论文部分内容阅读
摘 要 目的：探讨血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)的检测方法及临床意义。方法：采用速率法测定血清中GLDH的含量，20份正常血清作为对照组，100例各型肝脏疾病患者血清GLDH的检测结果进行评价。结果：肝病组GLDH明显高于对照组，两组相比有显著性差异(P<0.01)；GLDH试剂的批内精密度CV<5%，有很好的重现性；国产GLDH试剂盒对样本的检测数据与进口试剂检测的结果无显著差异(P>0.05)，高度相关(R>0.999)；线性上限可>500U/L。结论：用速率法测定血清中GLDH的含量具有简便、快速、稳定性好、精密度高的特点，测定血清中GLDH活性变化，可作为诊断肝细胞病变，酒精及药物性肝损伤，特别是坏死型肝病的重要指标。
关键词 谷氨酸脱氢酶 速率法 肝脏疾病
谷氨酸脱氢酶(GLDH)是含锌的金属合成酶，它催化谷氨酸脱氢、脱氨生成α-酮戊二酸之间的不可逆反应。此反应的体内大多数氨基酸经联合脱氨去氨基的关键步骤，也是体外非必须氨基酸由联合脱氨逆向反应生成的重要反应，还是连接氨基酸代谢，三羧酸循环的中心环节，故GLDH主要分布于肝细胞线粒体内，在正常情况下，血清中GLDH 的活性是很低的，通常<10U/L，只有在肝细胞受损害时才明显升高。
材料和方法
试剂和仪器：日立公司7170型全自动生化分析仪，GLDH试剂盒(批号0711260001)由吉林省惠强生物技术有限公司提供，低值和高值质控物(批号分别为171074，169839)均由罗氏公司提供。
样本来源：对照组共20例，年龄18～75岁，均为健康体检者。肝病组共100例，均为医院确诊的各种肝病患者，年龄18～75岁。
方法对比试验：对照组和疾病组在相同条件下进行检测，求P值判断其结果差异是否有显著性。
精密度试验：取低、高2份质控物进行连续测定20次，进行批内试验。
准确性试验：从肝病组中任意选取20份血清用惠强公司提供的GLDH试剂盒与日本和光 GLDH在相同条件下进行了相关性检测及对比试验，对比其结果。
线性试验：取1份高值的标本，用生理盐水稀释为20份不同浓度的测试样本进行试验，然后计算回归方程。
结 果
对比试验肝病组GLDH明显高于对照组，两组相比差异有显著性 (P<0.01)。结果见表1。
精密度试验：低(21.0U/L)、高(39.4U/L)标本的批内变异系数(CV)值分别为2.25%、3.16%。
准确性试验：两种试剂检测GLDH的结果高度相关(检测结果见表2)，相关系数在r=0.999以上，且无显著差异(P>0.05)，所以惠强提供的异柠檬酸脱氢酶试剂盒所检测的结果是准确可靠的。
样本：血清
相关系数：r=0.998(n=20)
回归方程：Y=0.99X+1.64
Y：惠强试剂(U/L)
X：日本和光试剂(U/L)
线性试验：高值(500U/L)标本，用生理盐水稀释为6份不同浓度的测试样本，线性方程为Y=0.9925X+0.341，R2=09999。从0～500U/L具有很好的线性关系。
讨 论
本研究的对比试验显示肝病组GLDH明显高于对照组，精密度试验有很好的重现性，准确性试验显示国内外两个厂家的试剂检测结果无显著差异，线性试验表明最大检测浓度可达>500U/L。结果表明，对于肝细胞损伤性疾病患者，血清中谷氨酸脱氢酶的活性明显高于健康者和其他疾病患者(P<0.01)。其中急性坏死性肝病患者>急性病毒性肝炎>酒精肝>肝硬化>慢性活动性肝炎。谷氨酸脱氢酶作为肝细胞病变，特别是急性缺血性肝炎和酒精性肝炎的诊断指标具有重要临床价值，并对指导临床治疗和预后判定具有重要意义。
该酶主要存在于肝线粒体中，故可作为肝损害的特异性指标。①急性肝炎活动期明显增高。②由于GLDH分子量较大，血中半衰期较长，故恢复正常较慢.在慢性肝炎中，GLDH的阳性率与ALT/AST等基本相同。③而当肝实质损伤加重时，GLDH明显优于ALT/AST及ALP。所以GLDH增高比ALT提前出现。④在缺血性肝炎时GLDH最敏感，上升幅度最大。并具有较强的特异性，可作为缺血性肝炎的特异性诊断指标。⑤GLDH在肝小叶中央活力较肝小叶周围活力大1.7倍，因此在洒精性肝病中升高显著，对诊断洒精性肝病有较高临床价值。⑥肝硬化代偿期，GLDH活性较正常人无显著性差异，当损伤累及线粒体时才升高，故可作为判断肝硬化是否活动的标。⑦GLDH不易受到药物抑制和诱导影响，能特异反映细胞损伤程序，动态观察活性改变对肝炎的治疗及预后估计有重要意义。
参考文献
1 Weres LV.Glulamete clebryrogenase a reliable morker of live cell necrosis in clcoholie beit.Mod J，1997，2：1058.
2 Glutamate dehydrogenase：a reliable marker of live cell necrosis in clcoholie.British Medical Journal，Waes LV，1997，2：1058.
3 Advantages of gluta mate dehydrogenase as a blood biomarker of acute hepatic injury in rats.Lab Anim，O'Brien P J Polley，-S-R Polley，-S-R，2002，36：313-3.
4 血清谷氨酸脱氢酶的检测及临床意义.国外医学临床生物化学与检验学分析，2001，22(4)：209.
5 肖晓光，王华.血清谷氨酸脱氢酶的检测及对肝病诊断的临床应用.大连医科大学学报，2004，26：48-50.
关键词 谷氨酸脱氢酶 速率法 肝脏疾病
谷氨酸脱氢酶(GLDH)是含锌的金属合成酶，它催化谷氨酸脱氢、脱氨生成α-酮戊二酸之间的不可逆反应。此反应的体内大多数氨基酸经联合脱氨去氨基的关键步骤，也是体外非必须氨基酸由联合脱氨逆向反应生成的重要反应，还是连接氨基酸代谢，三羧酸循环的中心环节，故GLDH主要分布于肝细胞线粒体内，在正常情况下，血清中GLDH 的活性是很低的，通常<10U/L，只有在肝细胞受损害时才明显升高。
材料和方法
试剂和仪器：日立公司7170型全自动生化分析仪，GLDH试剂盒(批号0711260001)由吉林省惠强生物技术有限公司提供，低值和高值质控物(批号分别为171074，169839)均由罗氏公司提供。
样本来源：对照组共20例，年龄18～75岁，均为健康体检者。肝病组共100例，均为医院确诊的各种肝病患者，年龄18～75岁。
方法对比试验：对照组和疾病组在相同条件下进行检测，求P值判断其结果差异是否有显著性。
精密度试验：取低、高2份质控物进行连续测定20次，进行批内试验。
准确性试验：从肝病组中任意选取20份血清用惠强公司提供的GLDH试剂盒与日本和光 GLDH在相同条件下进行了相关性检测及对比试验，对比其结果。
线性试验：取1份高值的标本，用生理盐水稀释为20份不同浓度的测试样本进行试验，然后计算回归方程。
结 果
对比试验肝病组GLDH明显高于对照组，两组相比差异有显著性 (P<0.01)。结果见表1。
精密度试验：低(21.0U/L)、高(39.4U/L)标本的批内变异系数(CV)值分别为2.25%、3.16%。
准确性试验：两种试剂检测GLDH的结果高度相关(检测结果见表2)，相关系数在r=0.999以上，且无显著差异(P>0.05)，所以惠强提供的异柠檬酸脱氢酶试剂盒所检测的结果是准确可靠的。
样本：血清
相关系数：r=0.998(n=20)
回归方程：Y=0.99X+1.64
Y：惠强试剂(U/L)
X：日本和光试剂(U/L)
线性试验：高值(500U/L)标本，用生理盐水稀释为6份不同浓度的测试样本，线性方程为Y=0.9925X+0.341，R2=09999。从0～500U/L具有很好的线性关系。
讨 论
本研究的对比试验显示肝病组GLDH明显高于对照组，精密度试验有很好的重现性，准确性试验显示国内外两个厂家的试剂检测结果无显著差异，线性试验表明最大检测浓度可达>500U/L。结果表明，对于肝细胞损伤性疾病患者，血清中谷氨酸脱氢酶的活性明显高于健康者和其他疾病患者(P<0.01)。其中急性坏死性肝病患者>急性病毒性肝炎>酒精肝>肝硬化>慢性活动性肝炎。谷氨酸脱氢酶作为肝细胞病变，特别是急性缺血性肝炎和酒精性肝炎的诊断指标具有重要临床价值，并对指导临床治疗和预后判定具有重要意义。
该酶主要存在于肝线粒体中，故可作为肝损害的特异性指标。①急性肝炎活动期明显增高。②由于GLDH分子量较大，血中半衰期较长，故恢复正常较慢.在慢性肝炎中，GLDH的阳性率与ALT/AST等基本相同。③而当肝实质损伤加重时，GLDH明显优于ALT/AST及ALP。所以GLDH增高比ALT提前出现。④在缺血性肝炎时GLDH最敏感，上升幅度最大。并具有较强的特异性，可作为缺血性肝炎的特异性诊断指标。⑤GLDH在肝小叶中央活力较肝小叶周围活力大1.7倍，因此在洒精性肝病中升高显著，对诊断洒精性肝病有较高临床价值。⑥肝硬化代偿期，GLDH活性较正常人无显著性差异，当损伤累及线粒体时才升高，故可作为判断肝硬化是否活动的标。⑦GLDH不易受到药物抑制和诱导影响，能特异反映细胞损伤程序，动态观察活性改变对肝炎的治疗及预后估计有重要意义。
参考文献
1 Weres LV.Glulamete clebryrogenase a reliable morker of live cell necrosis in clcoholie beit.Mod J，1997，2：1058.
2 Glutamate dehydrogenase：a reliable marker of live cell necrosis in clcoholie.British Medical Journal，Waes LV，1997，2：1058.
3 Advantages of gluta mate dehydrogenase as a blood biomarker of acute hepatic injury in rats.Lab Anim，O'Brien P J Polley，-S-R Polley，-S-R，2002，36：313-3.
4 血清谷氨酸脱氢酶的检测及临床意义.国外医学临床生物化学与检验学分析，2001，22(4)：209.
5 肖晓光，王华.血清谷氨酸脱氢酶的检测及对肝病诊断的临床应用.大连医科大学学报，2004，26：48-50.