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【摘 要】目的：探讨幽门螺旋杆菌（helicobacter pylori）感染与胃癌中Shh和C-myc表达的关系。方法：应用ELISA法对2008年9月～2012年9月入住我院的100例胃癌组织以及46例正常胃上皮组织中的Shh以及C-myc的临床表达，并探讨Shh与C-myc在胃癌组织中的表达及其与Hp感染之间的关系。结果：Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，Shh在Hp感染呈阳性与阴性胃癌中的阳性表达率之间的差异具有统计学意义（P<0.05），但C-myc在两种病例中无统计学差异（P>0.05）。结论：胃癌组织中的Shh及C-myc两种基因的表达与Hp感染存在着一定的关系，可作为胃上皮组织发生肿瘤化的重要指示基因。
【关键词】幽门螺旋杆菌（HP）；胃癌；Shh；C-myc
【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）09—0132—02
相关研究证实，Shh的激活与人类胃肠道肿瘤的生长有着十分密切的关系，而这种激活不依赖于通路元件所出现的突变，而仅仅依赖于配体本身所具有的活性[1]。那么，这就提示了Shh可能是一种新的胃肠道肿瘤的原癌基因。由上述结果可知，Shh在胃癌的发生于发展过程中被激活，从而促进了一系列癌性事件的发生，这个结果与美国生理学家Vita.M的研究结果一致。本文主要探讨了幽门螺旋杆菌（HP）感染与胃癌中Shh和C-myc表达之间的关系，现将具体的研究結果报道如下。
1 资料及方法
1.1 临床资料 收集2008年9月～2012年9月入住我院的100例胃癌组织以及46例正常胃的临床资料。胃癌患者100例中，包括黏液癌患者39例、低分化腺癌患者35例以及高中分化腺癌患者26例，男性患者59例、女性患者41例，年龄23～85岁，平均年龄为（61.77±12.22）岁；非肿瘤患者（全部为慢性胃炎）胃粘膜患者49例，男性患者18例、女性患者25例，年龄22～77岁，平均年龄为（57.16±10.26）岁。
1.2 研究方法 在进行免疫组化试验之前，制作组织微列阵切片。试验二甲苯对组织切片进行脱蜡处理，然后再使用一定浓度的经过一定倍数稀释的乙醇对其进行脱水处理，再将其浸泡于3%的双氧水之中，使得内源性的过氧化氢酶迅速失活 [3-4]。然后，将切片浸泡于硼酸盐的缓冲溶液之中，然后将其置于微波炉之中进行抗原恢复，时间为15～20min，在此过程中应注意持续性的使用抗生素蛋白以及生物素。上述组织切片在兔抗Shh以及C-myc的单抗溶液中进行孵化，约为1小时，然后使用0.1%的Tween-20冲洗液连续冲洗2～3次，随后，组织切片再经过20min的辣根过氧化物酶连接的抗生物素蛋白链菌素溶液中的孵化过程。然后再次重复上述冲洗的步骤，然后浸入液体的3，3’-二氨基联苯约5min，最后，使用苏木精对上述浸润的组织切片进行复染。待完全脱水与树脂包埋之后，方能进行检测。
1.3 结果判定标准[2] Shh与C-myc阳性表达均为细胞质着棕黄色。结果判定标准：于细胞靶部位对切片进行着色或者均匀性着色者规定为阳性细胞。随机选取3个视野，并在高倍镜下加以观察，按照阳性细胞的染色强度及其所占的比例加以判定：（1）阴性（—）：阳性细胞数/总细胞数<5%且为弱着色者；（20阳性（+）：阳性细胞数/总细胞数为5～50%且为中等着色者；（3）强阳性（++）：阳性细胞数/总细胞数>50%且为中等着色者。
1.4 统计学处理 本文中的数据均由SPSS13.0软件加以统计及分析，计量数据采用卡方检验，以P<0.05表示组间存在统计学差异，P>0.05表示组间不存在统计学差异。
2 结果
胃癌Hp感染与Shh及C-myc表达的关系见表1。由下表可知，Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，Shh表达的阳性率分别为23.68%与69.35%，二者存在统计学差异（ =5.665，P<0.05）；在Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，C-myc表达的阳性率分别为54.76%、74.14%，二者不存在统计学差异（ =0.534，P>0.05）。
3 讨论
Shh基因可编码出一种具有分泌性的信号蛋白，此种信号蛋白的激活与人们的肠道肿瘤生长存在一定的关系。Hp是一种非常重要的致癌因子，因此受到了医学界的高度关注，而且在临床上得到了实践研究的证实。C-myc属于一种较为常见的原癌基因，它能够促进细胞的生长与繁殖[2]。当胃癌组织中的上述两种原癌基因表达时，就会出现明显的协同或相加作用，从而在很大程度上促进了胃癌上皮组织的生长[3～4]。C-myc的表达一般会受到多水平机制的调控影响，然后对肿瘤的增殖起到一定的促进作用。本研究结果显示：Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，Shh在Hp感染呈阳性与阴性胃癌中的阳性表达率之间的差异具有统计学意义（P<0.05），但C-myc在两种病例中无统计学差异（P>0.05）。
综上所述，胃癌组织中的Shh及C-myc两种基因的表达与Hp感染存在着一定的关系，可作为胃上皮组织发生肿瘤化的重要指示基因。
参考文献：
[1] 黄祥， 杨桂芳. 白介素-1β、白介素-6在胃癌组织中的表达及与幽门螺旋杆菌感染的关系探讨[J].数理医药学杂志，2011，24（3）：354-355.
[2] 邸旭，洪亮. 胃癌组织中COX-2表达与幽门螺旋杆菌感染的关系[J].山东医药，2009，49（42）：105-106.
[3] 周先勇，周会新. 幽门螺旋杆菌感染对胃癌患者APEl基因表达的影响[J].医学临床研究，2010，27（4）：602-603.
[4] 刘爱群，葛莲英. 幽门螺旋杆菌
【关键词】幽门螺旋杆菌（HP）；胃癌；Shh；C-myc
【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）09—0132—02
相关研究证实，Shh的激活与人类胃肠道肿瘤的生长有着十分密切的关系，而这种激活不依赖于通路元件所出现的突变，而仅仅依赖于配体本身所具有的活性[1]。那么，这就提示了Shh可能是一种新的胃肠道肿瘤的原癌基因。由上述结果可知，Shh在胃癌的发生于发展过程中被激活，从而促进了一系列癌性事件的发生，这个结果与美国生理学家Vita.M的研究结果一致。本文主要探讨了幽门螺旋杆菌（HP）感染与胃癌中Shh和C-myc表达之间的关系，现将具体的研究結果报道如下。
1 资料及方法
1.1 临床资料 收集2008年9月～2012年9月入住我院的100例胃癌组织以及46例正常胃的临床资料。胃癌患者100例中，包括黏液癌患者39例、低分化腺癌患者35例以及高中分化腺癌患者26例，男性患者59例、女性患者41例，年龄23～85岁，平均年龄为（61.77±12.22）岁；非肿瘤患者（全部为慢性胃炎）胃粘膜患者49例，男性患者18例、女性患者25例，年龄22～77岁，平均年龄为（57.16±10.26）岁。
1.2 研究方法 在进行免疫组化试验之前，制作组织微列阵切片。试验二甲苯对组织切片进行脱蜡处理，然后再使用一定浓度的经过一定倍数稀释的乙醇对其进行脱水处理，再将其浸泡于3%的双氧水之中，使得内源性的过氧化氢酶迅速失活 [3-4]。然后，将切片浸泡于硼酸盐的缓冲溶液之中，然后将其置于微波炉之中进行抗原恢复，时间为15～20min，在此过程中应注意持续性的使用抗生素蛋白以及生物素。上述组织切片在兔抗Shh以及C-myc的单抗溶液中进行孵化，约为1小时，然后使用0.1%的Tween-20冲洗液连续冲洗2～3次，随后，组织切片再经过20min的辣根过氧化物酶连接的抗生物素蛋白链菌素溶液中的孵化过程。然后再次重复上述冲洗的步骤，然后浸入液体的3，3’-二氨基联苯约5min，最后，使用苏木精对上述浸润的组织切片进行复染。待完全脱水与树脂包埋之后，方能进行检测。
1.3 结果判定标准[2] Shh与C-myc阳性表达均为细胞质着棕黄色。结果判定标准：于细胞靶部位对切片进行着色或者均匀性着色者规定为阳性细胞。随机选取3个视野，并在高倍镜下加以观察，按照阳性细胞的染色强度及其所占的比例加以判定：（1）阴性（—）：阳性细胞数/总细胞数<5%且为弱着色者；（20阳性（+）：阳性细胞数/总细胞数为5～50%且为中等着色者；（3）强阳性（++）：阳性细胞数/总细胞数>50%且为中等着色者。
1.4 统计学处理 本文中的数据均由SPSS13.0软件加以统计及分析，计量数据采用卡方检验，以P<0.05表示组间存在统计学差异，P>0.05表示组间不存在统计学差异。
2 结果
胃癌Hp感染与Shh及C-myc表达的关系见表1。由下表可知，Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，Shh表达的阳性率分别为23.68%与69.35%，二者存在统计学差异（ =5.665，P<0.05）；在Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，C-myc表达的阳性率分别为54.76%、74.14%，二者不存在统计学差异（ =0.534，P>0.05）。
3 讨论
Shh基因可编码出一种具有分泌性的信号蛋白，此种信号蛋白的激活与人们的肠道肿瘤生长存在一定的关系。Hp是一种非常重要的致癌因子，因此受到了医学界的高度关注，而且在临床上得到了实践研究的证实。C-myc属于一种较为常见的原癌基因，它能够促进细胞的生长与繁殖[2]。当胃癌组织中的上述两种原癌基因表达时，就会出现明显的协同或相加作用，从而在很大程度上促进了胃癌上皮组织的生长[3～4]。C-myc的表达一般会受到多水平机制的调控影响，然后对肿瘤的增殖起到一定的促进作用。本研究结果显示：Hp感染呈阳性与阴性胃癌中，Shh在Hp感染呈阳性与阴性胃癌中的阳性表达率之间的差异具有统计学意义（P<0.05），但C-myc在两种病例中无统计学差异（P>0.05）。
综上所述，胃癌组织中的Shh及C-myc两种基因的表达与Hp感染存在着一定的关系，可作为胃上皮组织发生肿瘤化的重要指示基因。
参考文献：
[1] 黄祥， 杨桂芳. 白介素-1β、白介素-6在胃癌组织中的表达及与幽门螺旋杆菌感染的关系探讨[J].数理医药学杂志，2011，24（3）：354-355.
[2] 邸旭，洪亮. 胃癌组织中COX-2表达与幽门螺旋杆菌感染的关系[J].山东医药，2009，49（42）：105-106.
[3] 周先勇，周会新. 幽门螺旋杆菌感染对胃癌患者APEl基因表达的影响[J].医学临床研究，2010，27（4）：602-603.
[4] 刘爱群，葛莲英. 幽门螺旋杆菌