【摘 要】
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探讨苓桂术甘汤（Linggui Zhugan Decotion）含药血清通过调节核因子E2相关因子2（Nrf2）/B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）信号通路对心肌细胞线粒体氧化应激的影响。制备苓桂术甘汤含药血清与空白血清，构建体外H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化应激模型，将H9c2细胞分为正常对照组、H2O2模型组、20%空白血清组、20%苓桂术甘汤含药血清组。H9c2细胞
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81973844,82004180）； 安徽省高校自然科学研究重点项目（KJ2020A0393）；
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探讨苓桂术甘汤（Linggui Zhugan Decotion）含药血清通过调节核因子E2相关因子2（Nrf2）/B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）信号通路对心肌细胞线粒体氧化应激的影响。制备苓桂术甘汤含药血清与空白血清，构建体外H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化应激模型，将H9c2细胞分为正常对照组、H2O2模型组、20%空白血清组、20%苓桂术甘汤含药血清组。H9c2细胞按照分组分别预处理12 h后，加入100μmol·L-1 H2O2继续培养6 h, DCFH-DA检测各组细胞内活性氧（ROS）的水平，calcein AM荧光探针检测线粒体通透性转换孔道（mPTP）的开放程度，Western blot法检测各组细胞中细胞质细胞色素C（CytC）、线粒体CytC、细胞质及细胞核中Nrf2的表达以及BNIP3的变化水平。siRNA-Nrf2转染制备Nrf2沉默的H9c2细胞，观察Nrf2沉默后苓桂术甘汤含药血清对H2O2刺激H9c2细胞后ROS、mPTP、细胞质CytC、线粒体CytC及BNIP3的表达。结果显示，与正常对照组相比，H2O2模型组ROS含量、mPTP开放程度显著增加（P＜0.01）,细胞核Nrf2、BNIP3、细胞质CytC表达显著升高（P＜0.01）,细胞质Nrf2无明显变化，线粒体CytC表达显著下降（P＜0.01）;苓桂术甘汤含药血清干预可以显著降低ROS含量（P＜0.01）,抑制mPTP开放程度（P＜0.01）,减少细胞质CytC的表达（P＜0.01）,升高线粒体CytC的表达（P＜0.01）,促进Nrf2核转位（P＜0.05）,降低BNIP3表达（P＜0.01）。而Nrf2沉默后，苓桂术甘汤含药血清减少ROS产生、降低BNIP3表达及抑制mPTP开放与CytC释放的作用被逆转（P＜0.01）。以上结果表明苓桂术甘汤含药血清可以通过调节Nrf2/BNIP3信号通路，减轻心肌细胞线粒体氧化应激损伤。
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