基于响应面法对黑木耳栽培料中纤维素酶提取及测定条件的优化

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为了准确测定黑木耳菌包中纤维素酶的酶活性,为黑木耳菌种活力检测、栽培生产提供科学的理论依据,运用3种不同的方法对菌料进行处理,并根据单因素试验,利用响应面Box-Behnken设计方法,以纤维素酶活性为测定指标,选择出黑木耳菌料的最佳处理方法及纤维素酶的最优浸提条件与测定条件。结果表明,将黑木耳菌料经过筛处理后培养3d纤维素酶有最大的活性;响应面结果显示,黑木耳纤维素酶的最佳浸提条件为:浸提时间2.51 h、料液比1:15.64、浸提温度50.87℃,纤维素酶活性为12.703 1 U/mL。纤维素酶的最佳测定条件为反应温度52.31℃,酶量0.92 mL,pH 4.98,纤维素酶活性为14.856 5 U/mL。本实验通过对测定中损伤的菌丝进行再培养,使其恢复产酶活性后,运用响应面的方法对纤维素酶的提取条件及测定条件进行优化,系统地测定出黑木耳纤维素酶的最优活性检测条件,为黑木耳菌株的筛选和品种鉴定提供了准确、系统的理论依据。
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