论文部分内容阅读
摘要：在药品生产的过程中，需要做好生产设备的清洁和验证的工作。清洁验证对于药品企业的安全生产非常的重要。
关键词：药品设备;清洁验证;关键点
引言：清洁验证是通过科学的方法，采集足够的数据证明，通过相应的措施清洁设备后，能够达到预定标准。在制药企业中，同一设备可能生产多种产品，在上种产品生产结束后，对设备进行有效的清洁可以防止该产品的化学残留及微生物残留对下一个品种生产的污染。设备的清洁验证应综合考虑设备的使用情况、取样方法、取样位置的选择、清洁剂及消毒剂的使用，以及残留物检验方法的灵敏度、取样回收率、残留限度的计算等因素。
一、法规对清洁的要求
对于设备的清洁，各国法规都有明确的要求，我国药品生产质量管理规范（2010年修订）明确规定要选取易于清洁的设备、有详细的操作规程指导设备清洁、进行清洁验证证明方法的有效性。最终目的为防止污染和交叉污染。
二、清洁工作与清洁验证的关键点
从以下六个方面对清洁验证的关键点进行分析。
（一）选择合适的清洁目标化合物和清洁溶剂
清洁的过程就是溶解的过程，在实际生产中设备一般会生产多个品种，各个品种的理化性质存在着较大的差异，一般会选择难清洁的、活性或者毒性比较高的成分作为清洁的标记物[1]。
清洁溶剂的选择应能够有效的溶解残留物且不容易腐蚀设备并易于清除，不对产品产生新的污染[2]。对于水溶性的，首选的清洁剂为水、热水、碱性水或酸性水;对于水不溶、极性小的，首选乙醇，次选异丙醇、丙酮等[3]。应避免选择家用的清洁剂，因为其成分比较复杂，微生物不加控制、质量波动较大且供应商不公布组成成分，无法证明清洁剂的清洁达标。
通过以下的例子，对清洁溶剂的选择进行分析。假设，某药厂企业反应釜进行以下的化学反应。（1000L的不锈钢反应釜，表面积在5.2平方米）化学式为：X+Y→Z（W是杂质），乙醇是反应介质。反应溶剂乙醇用量大约500L。每批反应会投入过量的X。这几种物质在常见溶剂水、乙醇、丙酮中的溶解度见表1。
从上面的实验内容可知，反应物X、Y易溶于乙醇，并有500L的乙醇作为介质，因此，X和Y残留的可能性可以进行排除。而Z和W不溶于乙醇，很多析出固体会被转移走，但会有少量残留存在容器壁上，从而影响下次生产。而Z、W均溶解于丙酮，而丙酮易溶于水，易于去除，因此可以选择丙酮作为清洁溶剂。
（二）清洁方法
设备清洁方法有手工清洗和在线清洗。清洁方法的选择由设备材质、结构、几何形状等特点决定。
（三）残留限度的确定
目前，化学残留通用的有3种计算方法。
（1）目视法
目测设备内外及附属物无可见残留物，目视检查标准按4μg/cm2计。
（2）生物学活性限度：最低日治疗剂量的1/1000
即下批产品最高日服用剂量中含有上批产品的量不应超过上批产品最低日治疗剂量的1/1000。
计算公式：Ld=MTDD×B/uw×1/Dd×1/SA×1000（μg/cm2）
其中： MTDD当批生产产品的最低日剂量（mg）
B下批产品最小生产批量Kg
uw下批产品单位制剂重量g
Dd下批产品每日最多服用片数
SA为共线设备内表面积（cm2）
（3）浓度限度：10ppm
指在下一批产品中残留的上批产品的数量级别为十万分之一（10ppm）。 计算公式：残留物限度L=10×103B/SA（μg/cm2），其中B为下批生产的批量，SA为共线设备总内表面积。
选取3种方法中计算最小的数为残留限度。
微生物残留限度可以参考相应洁净级别表面微生物的要求。
（四）检验方法的选择及检验方法验证
选择合适的检验方法，通常紫外可见分光光度法和高效的液相色谱法能够满足检测要求。检验方法需要进行专属性、精密度、准确度、线性、范围以及定量限、检测限等方面的验证。
（1）专属性。专属性是指在其他成分（如杂质、降解产物等）存在下，分析方法能准确测定出被测物。在清洁验证中，应当考虑溶剂干扰、降解产物干扰、杂质干扰、辅料干扰、擦拭法用棉签干扰等。
（2）准确度。是指测定结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率表示。
（3）精密度。是指在规定条件下，同一份均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。取同一浓度样品，至少连续6次测定，计算相对标准偏差（RSD），一般要求RSD≤10%。
（4）线性和范围。线性是指在设计范围内，检测结果与试样中被测物的量直接呈线性比例关系的能力。一般选取5个浓度范围进行线性相关性检查，线性相关性应不低于0.99，清洁验证中浓度范围一般为残留物限度浓度的50-150%。
（5）检测限（LOD）和定量限（LOQ）。检测限是指被测物能被检测的最小量;定量限是指被测物能被准确测定的最小量。通用方法是用信噪比法，检测限的信噪比为3，定量限的信噪比为10。
对于残留成分比较复杂，无法确定目标化合物的情况，可以采用总有机碳（TOC）分析方法进行检测。TOC分析方法较高效液相法灵敏度更高且检验周期短，另外不需要进行专属性验证。
（五）取样方法及取样方法验证
在清洁验证中，取样方法一般采用淋洗水法和擦拭取样法。擦拭取样方法具有简单性、直观性和高效性，能够对难以清洁的部位直接取样。而淋洗水法，是一种间接性的取样方法，当有些设备的表面无法使用擦拭法取样的时候，可以采用淋洗水法进行取样，大部分企业采用的清洁剂是水。残留物检测样品与微生物检测样品应分开取样。
需要对取样方法的有效性进行验证，一般通过回收率试验来确认。擦拭法的回收率的测定方法：选取与生产设备相同材质的板材，划出大小相同的区域，分别喷洒已知浓度的目标化合物对照溶液，干燥后用选定的溶剂润湿棉棒后在板材表面进行擦拭，擦拭法的回收率一般要求不小于50%，相对标准偏差RSD≤20%。
（六）取样位置的选择
选择最难清洁的部分作为取样点，使得采样的部位具有代表性，选择结构复杂、不容易冲洗的区域。同一取样位置取样点应大于三个，如设备面积较小，可适当减少取样点。
结束语：药物能够治疗疾病、调节生理机能，但是同时也存在着一定的毒副作用，严重的情况下甚至会导致人们的死亡。做好设备的清洁工作，可以有效的减少微生物的残留，减少代谢的产物，减少生产中的不良因素，提高药品的安全性。
参考文献：
[1]芦旭升. 药品生产设备清洁验证关键点的研究[J]. 科学与财富， 2017（25）：262-262.
[2]药品GMP指南（2010年版）.
[3]马慧蕾. 浅谈风险分析在药品生产设备清洁验证中的应用[J]. 科學技术创新， 2016（4）：46-46.
关键词：药品设备;清洁验证;关键点
引言：清洁验证是通过科学的方法，采集足够的数据证明，通过相应的措施清洁设备后，能够达到预定标准。在制药企业中，同一设备可能生产多种产品，在上种产品生产结束后，对设备进行有效的清洁可以防止该产品的化学残留及微生物残留对下一个品种生产的污染。设备的清洁验证应综合考虑设备的使用情况、取样方法、取样位置的选择、清洁剂及消毒剂的使用，以及残留物检验方法的灵敏度、取样回收率、残留限度的计算等因素。
一、法规对清洁的要求
对于设备的清洁，各国法规都有明确的要求，我国药品生产质量管理规范（2010年修订）明确规定要选取易于清洁的设备、有详细的操作规程指导设备清洁、进行清洁验证证明方法的有效性。最终目的为防止污染和交叉污染。
二、清洁工作与清洁验证的关键点
从以下六个方面对清洁验证的关键点进行分析。
（一）选择合适的清洁目标化合物和清洁溶剂
清洁的过程就是溶解的过程，在实际生产中设备一般会生产多个品种，各个品种的理化性质存在着较大的差异，一般会选择难清洁的、活性或者毒性比较高的成分作为清洁的标记物[1]。
清洁溶剂的选择应能够有效的溶解残留物且不容易腐蚀设备并易于清除，不对产品产生新的污染[2]。对于水溶性的，首选的清洁剂为水、热水、碱性水或酸性水;对于水不溶、极性小的，首选乙醇，次选异丙醇、丙酮等[3]。应避免选择家用的清洁剂，因为其成分比较复杂，微生物不加控制、质量波动较大且供应商不公布组成成分，无法证明清洁剂的清洁达标。
通过以下的例子，对清洁溶剂的选择进行分析。假设，某药厂企业反应釜进行以下的化学反应。（1000L的不锈钢反应釜，表面积在5.2平方米）化学式为：X+Y→Z（W是杂质），乙醇是反应介质。反应溶剂乙醇用量大约500L。每批反应会投入过量的X。这几种物质在常见溶剂水、乙醇、丙酮中的溶解度见表1。
从上面的实验内容可知，反应物X、Y易溶于乙醇，并有500L的乙醇作为介质，因此，X和Y残留的可能性可以进行排除。而Z和W不溶于乙醇，很多析出固体会被转移走，但会有少量残留存在容器壁上，从而影响下次生产。而Z、W均溶解于丙酮，而丙酮易溶于水，易于去除，因此可以选择丙酮作为清洁溶剂。
（二）清洁方法
设备清洁方法有手工清洗和在线清洗。清洁方法的选择由设备材质、结构、几何形状等特点决定。
（三）残留限度的确定
目前，化学残留通用的有3种计算方法。
（1）目视法
目测设备内外及附属物无可见残留物，目视检查标准按4μg/cm2计。
（2）生物学活性限度：最低日治疗剂量的1/1000
即下批产品最高日服用剂量中含有上批产品的量不应超过上批产品最低日治疗剂量的1/1000。
计算公式：Ld=MTDD×B/uw×1/Dd×1/SA×1000（μg/cm2）
其中： MTDD当批生产产品的最低日剂量（mg）
B下批产品最小生产批量Kg
uw下批产品单位制剂重量g
Dd下批产品每日最多服用片数
SA为共线设备内表面积（cm2）
（3）浓度限度：10ppm
指在下一批产品中残留的上批产品的数量级别为十万分之一（10ppm）。 计算公式：残留物限度L=10×103B/SA（μg/cm2），其中B为下批生产的批量，SA为共线设备总内表面积。
选取3种方法中计算最小的数为残留限度。
微生物残留限度可以参考相应洁净级别表面微生物的要求。
（四）检验方法的选择及检验方法验证
选择合适的检验方法，通常紫外可见分光光度法和高效的液相色谱法能够满足检测要求。检验方法需要进行专属性、精密度、准确度、线性、范围以及定量限、检测限等方面的验证。
（1）专属性。专属性是指在其他成分（如杂质、降解产物等）存在下，分析方法能准确测定出被测物。在清洁验证中，应当考虑溶剂干扰、降解产物干扰、杂质干扰、辅料干扰、擦拭法用棉签干扰等。
（2）准确度。是指测定结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率表示。
（3）精密度。是指在规定条件下，同一份均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。取同一浓度样品，至少连续6次测定，计算相对标准偏差（RSD），一般要求RSD≤10%。
（4）线性和范围。线性是指在设计范围内，检测结果与试样中被测物的量直接呈线性比例关系的能力。一般选取5个浓度范围进行线性相关性检查，线性相关性应不低于0.99，清洁验证中浓度范围一般为残留物限度浓度的50-150%。
（5）检测限（LOD）和定量限（LOQ）。检测限是指被测物能被检测的最小量;定量限是指被测物能被准确测定的最小量。通用方法是用信噪比法，检测限的信噪比为3，定量限的信噪比为10。
对于残留成分比较复杂，无法确定目标化合物的情况，可以采用总有机碳（TOC）分析方法进行检测。TOC分析方法较高效液相法灵敏度更高且检验周期短，另外不需要进行专属性验证。
（五）取样方法及取样方法验证
在清洁验证中，取样方法一般采用淋洗水法和擦拭取样法。擦拭取样方法具有简单性、直观性和高效性，能够对难以清洁的部位直接取样。而淋洗水法，是一种间接性的取样方法，当有些设备的表面无法使用擦拭法取样的时候，可以采用淋洗水法进行取样，大部分企业采用的清洁剂是水。残留物检测样品与微生物检测样品应分开取样。
需要对取样方法的有效性进行验证，一般通过回收率试验来确认。擦拭法的回收率的测定方法：选取与生产设备相同材质的板材，划出大小相同的区域，分别喷洒已知浓度的目标化合物对照溶液，干燥后用选定的溶剂润湿棉棒后在板材表面进行擦拭，擦拭法的回收率一般要求不小于50%，相对标准偏差RSD≤20%。
（六）取样位置的选择
选择最难清洁的部分作为取样点，使得采样的部位具有代表性，选择结构复杂、不容易冲洗的区域。同一取样位置取样点应大于三个，如设备面积较小，可适当减少取样点。
结束语：药物能够治疗疾病、调节生理机能，但是同时也存在着一定的毒副作用，严重的情况下甚至会导致人们的死亡。做好设备的清洁工作，可以有效的减少微生物的残留，减少代谢的产物，减少生产中的不良因素，提高药品的安全性。
参考文献：
[1]芦旭升. 药品生产设备清洁验证关键点的研究[J]. 科学与财富， 2017（25）：262-262.
[2]药品GMP指南（2010年版）.
[3]马慧蕾. 浅谈风险分析在药品生产设备清洁验证中的应用[J]. 科學技术创新， 2016（4）：46-46.