探索达努塞替处理人白血病细胞后极光激酶B/核糖体p70S6蛋白激酶/核糖体蛋白15(Aurora B/p70S6K/RPL15)信号通路的变化及细胞自噬的发生情况，并研究其作用机制。

选择髓系白血病细胞株THP－1和K562为研究对象。实验分为2部分，第1部分：分别采用0.1 μmol/L、1.0 μmol/L、5.0 μmol/L浓度达努塞替共培养THP－1和K562细胞，对照组(0 μmol/L达努塞替)加入体积分数为2 mL/L的二甲基亚砜(DMSO)，以上各组均作用24 h；采用四唑盐比色法检测细胞生长的抑制作用，流式细胞术检测细胞自噬情况，Western blot法检测p70S6K、Aurora B、磷脂酰肌醇3－激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白(LC3)、Beclin1、核糖体蛋白15(RPL15)的表达水平。第2部分：分别下调THP－1和K562细胞中Aurora B和RPL15，采用DMSO溶解达努塞替(5.0 μmol/L)，实验分组：DMSO组(空白对照组)、达努塞替处理组、空载质粒组、小干扰RNA (siRNA)组、空载质粒＋达努塞替处理组和siRNA＋达努塞替处理组。检测自噬信号通路PI3K/AKT/mTOR中Aurora B、p70S6K、RPL15和自噬蛋白Beclin1、LC3的表达情况。

1．达努塞替可抑制THP－1、K562细胞生长，半抑制浓度分别为26.9 μmol/L和30.2 μmol/L。2.在THP－1和K562细胞中，0.1 μmol/L、1.0 μmol/L、5.0 μmol/L浓度的达努塞替处理细胞后，p－Aurora B/Aurora B、p－p70S6K/p70S6K、RPL15、p－mTOR/mTOR、p－AKT/AKT蛋白表达水平均较对照组降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)；自噬蛋白Beclin1、LC3表达量及细胞自噬率均升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.THP－1细胞中，下调Aurora B后，siRNA组及siRNA＋达努塞替处理组p70S6K、RPL15分别低于空载质粒组22.1%、61.3%(F＝18.1，P＝0.001)和55.4%、56.1%(F＝19.4，P＝0.001)；LC3表达量较空载质粒组升高13.6%、17.1%(F＝15.4，P＝0.001)。下调RPL15后，siRNA组及siRNA＋达努塞替处理组Beclin1、LC3分别高于空载质粒组39.5%、92.3%(F＝25.2，P＝0.001)和40.2%、58.3%(F＝23.9，P＝0.001)。K562细胞，下调Aurora B后，siRNA组及siRNA＋达努塞替处理组p70S6K、RPL15分别低于空载质粒组24.2%、62.7%(F＝20.4，P＝0.001)和57.2%、60.1%(F＝23.9，P＝0.001)；LC3表达量较空载质粒组增加17.9%、56.7%(F＝20.9，P＝0.001)。下调RPL15后，siRNA组及siRNA＋达努塞替处理组Beclin1、LC3分别高于空载质粒组20.6%、98.4%(F＝22.4，P＝0.001)和41.5%、70.1%(F＝26.2，P＝0.001)。

达努塞替可能通过影响PI3K/AKT/mTOR自噬通路来抑制THP－1、K562白血病细胞的增殖，还可负性调控Aurora B/p70S6K/RPL15信号通路引起细胞发生程序性死亡，其中RPL15可能是Aurora B/p70S6K/RPL15信号通路中抑制肿瘤增殖作用的关键靶点。