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应用 P C R 定点突变方法构建编码 M et Lys双 C 肽人胰岛素原基因,并在大肠杆菌中以包含体方式获得表达 表达产物经还原、重组、 Sephadex G75 分离纯化,获得 M et Lys双 C 肽人胰岛素原,经胰蛋白酶与羧肽酶 B的酶解, Resource T M Q 阴离子交换柱层析分离制备得人胰岛素,其放免活性、受体结合活性均与猪胰岛素相同