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甲胎蛋白（AFP）是一种重要的胚胎期及肝癌相关蛋白，为了深入研究其在肝癌细胞增殖中的作用，构建了针对AFP基因的shRNA表达质粒，拟建立可稳定转染的肝癌细胞克隆；利用生物信息学方法设计。hRNA，经酶切连接和抗生素筛选构建表达质粒；通过酶切、琼脂糖凝胶电泳及测序对质粒加以验证；优化转染条件后采用脂染法转染肝癌SMMC-7721细胞，利用Puromycin筛选稳定转染的细胞克隆．成功获得高特异的shRNA设计结果，构建了针对人类AFP基因的shRNA表达质粒，并获得该质粒稳定转染的细胞克隆．