【摘 要】
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目的对结核分枝杆菌(MTB)PE家族的所有成员的结构进行分析,预测其抗原表位,截取Rv3388蛋白的优势抗原片段,对重组Rv3388蛋白及其它6种MTB特异性抗原进行评估,探讨不同结核特
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)(编号:ss2014AA021403);国家自然科学基金项目(编号:30872405,30472050,30972632)
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目的对结核分枝杆菌(MTB)PE家族的所有成员的结构进行分析,预测其抗原表位,截取Rv3388蛋白的优势抗原片段,对重组Rv3388蛋白及其它6种MTB特异性抗原进行评估,探讨不同结核特异性抗原与血清抗体的反应模式,评价血清学检测在结核病诊断中的价值。方法利用基因合成技术重叠延伸PCR扩增Rv3388蛋白637~731位的编码基因片段,原核表达并纯化重组蛋白pET32a/Rv3388637-731,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法对该抗血清进行免疫原性分析。同时对这7种MTB特异性蛋白的特异性及敏感性进行评价。结果重组蛋白pET32a/Rv3388637-731在大肠杆菌中的表达量占全菌蛋白的80%,ELISA显示有较强的免疫原性。7种MTB特异性抗原具有不同的反应模式,单个抗原检测敏感性较差。结论对MTBPE家族的蛋白结构分析,表达并纯化重组蛋白pET32a/Rv3388637-731,7种蛋白在血清抗体检测中具有抗原互补性,不同抗原与机体反应存在不同反应模式,提高结核抗体检测敏感性应多种抗原联合检测。
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