探索18β-甘草次酸钠对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠鼻黏膜胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)的作用。
方法100只Wistar大鼠雌雄各半,采用随机数字表法随机分为5组,分别为对照组、AR模型组、布地奈德组、18β-甘草次酸钠20 mg/kg剂量组和40 mg/kg剂量组,每组20只。除对照组外,其他4组以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏建立AR动物模型,造模成功后,布地奈德组、18β-甘草次酸钠20 mg/kg剂量组和40 mg/kg剂量组分别给予布地奈德、18β-甘草次酸钠20 mg/kg和40 mg/kg干预,检测时间点为用药2周和4周时。用免疫组织化学(免疫组化)法检测TSLP在大鼠鼻黏膜的分布情况;用免疫印迹法在蛋白水平检测大鼠鼻黏膜TSLP的表达;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)在基因水平检测大鼠鼻黏膜TSLP-mRNA的表达;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)4和OVA特异性IgE(OVA specific IgE,OVA-sIgE)的浓度水平。多组间比较采用单因素方差分析和最小显著差异法,两组间比较采用LSD t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
结果免疫组化证实大鼠鼻黏膜中TSLP表达于上皮细胞、内皮细胞和上皮纤毛处。免疫印迹和RT-PCR提示AR模型组较对照组大鼠的鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA表达明显增强(2周TSLP:1.795 9±0.131 4比0.990 5±0.164 2,4周TSLP:1.809 7±0.253 4比0.870 3±0.124 4;2周TSLP-mRNA:4.582 9±0.697 7比1.108 7±0.081 1,4周TSLP-mRNA:4.814 4±0.662 8比1.001 0±0.155 3;P值均<0.05)。给予药物干预2周、4周后,与AR模型组相比,布地奈德组、18β-甘草次酸钠20 mg/kg和40 mg/kg剂量组大鼠鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA的表达均被明显抑制[2周TSLP:(0.897 8±0.081 8)/(1.072 1±0.113 6)/(1.396 6±0.133 9)比1.795 9±0.131 4;4周TSLP:(1.191 0±0.161 3)/(1.141 0±0.152 3)/(1.200 5±0.189 6)比1.809 7±0.253 4;2周TSLP-mRNA:(1.175 6±0.100 9)/(1.254 4±0.078 2)/(2.037 2±0.559 2)比4.582 9±0.697 7;4周TSLP-mRNA:(1.158 3±0.104 3)/(1.224 0±0.034 0)/(1.275 2±0.099 6)比4.814 4±0.662 8;P值均<0.05],较对照组差异均无统计学意义。随着TSLP受抑制,血清IL-4、OVA-sIgE浓度也降低。
结论18β-甘草次酸钠对AR大鼠鼻黏膜TSLP有明显抑制作用,可以控制Th2型免疫炎性反应。