【摘 要】
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目的构建重组小鼠白细胞介素-4（rmIL-4）原核表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a（＋）上，获得重组质
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展规划项目(2004cb518800)资助
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目的构建重组小鼠白细胞介素-4（rmIL-4）原核表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a（＋）上，获得重组质粒pET32／rmIL-4，转入BL21（DE3）中经IPTG诱导表达得到包涵体。经复性处理后，依次用阴离子交换柱和分子筛纯化蛋白。对纯化得到的蛋白用Western blot检验免疫学特异性，用mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖实验和动物实验测定其生物学活性。结果经酶切和测序证实重组质粒pE
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