含有对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素的表达及纯化

来源 :中国药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xuliangaihui

【摘要】

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优化定点引入对叠氮苯丙氨酸的詹氏甲烷球菌属正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统,使用优化后的正交系统在大肠杆菌内表达并纯化在特定氨基酸位点引入对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素

【作者】

：

刘静娴田浤姚文兵陈海尹骏高向东

【机构】

：

中国药科大学生命科学与技术学院

【出处】

：

中国药科大学学报

【发表日期】

：

2012年3期

【关键词】

：

正交系统优化人内皮抑素突变体对叠氮苯丙氨酸 orthogonal system optimization human endostatin mutant p

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优化定点引入对叠氮苯丙氨酸的詹氏甲烷球菌属正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统,使用优化后的正交系统在大肠杆菌内表达并纯化在特定氨基酸位点引入对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素突变体。首先将正交酪氨酰tRNA合成酶启动子-15区的TATAA序列突变为TTAA序列,同时将正交酪氨酰tRNA合成酶的第286位天冬氨酸突变为精氨酸以提高对抑制型tRNA反密码子CUA的识别力。然后将质粒pST和pET32a-mhEn转化到大肠杆菌DH10BDE3中得到重组工程菌。该重组菌在含有对叠氮苯丙氨酸的培养基中培养,并经IPTG

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