观察不同浓度巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)对老年膝OA患者软骨细胞增殖代谢的影响。
方法收集健康年轻人和老年膝OA患者的血清、膝关节软骨标本各10例,检测标本中MIC-1的含量变化。常规培养人软骨细胞,对照组单纯加培养液,实验组培养液中含不同浓度重组人MIC-1蛋白,其中,实验组1浓度为10 ng/ml,实验组2浓度为100 ng/ml和实验组3浓度为200 ng/ml,培养48 h后,5-乙炔基-2-脱氧尿苷(EdU)检测软骨细胞增殖情况,蛋白质印迹法和实时荧光定量(qRT)-PCR检测软骨细胞pSmad2、Smad2和Col2等指标的表达情况。统计学分析采用t检验,单因素方差分析(ANOVA),Tukey法。
结果年轻人血清中MIC-1蛋白相对表达量(0.89±0.11)高于老年人(0.48±0.12),差异有统计学意义(t=2.58,P<0.05)。对照组EdU阳性细胞百分比为(26.8±1.5)%,实验组1为(26.2±1.6)%,实验组2为(35.2±1.8)%,实验组3为(45.6±2.7)%,多组间比较差异有统计学意义(F=21.45,P<0.01)。pSmad2蛋白相对表达量在多组之间比较差异有统计学意义(F=18.32,P<0.01),其中,实验组2(1.25±0.11)和实验组3(0.93±0.22)分别高于对照组(0.54±0.10);多组比较Col2蛋白相对表达量差异有统计学意义(F=17.90,P<0.01),其中,实验组2(1.28±0.14)和实验组3(1.74±0.14)分别高于对照组(0.80±0.04)。Col2的mRNA相对表达量在多组间比较差异有统计学意义(F=17.90,P<0.01),其中,实验组2(1.13±0.16)和实验组3(1.65±0.15)分别高于对照组(0.49±0.10)。
结论老年膝OA患者血清和软骨组织MIC-1含量低于年轻人,MIC-1可以促进老年膝关节软骨细胞增殖。