【摘 要】
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目的 探讨瘦素预处理对原代培养神经元氧糖剥夺/复糖复氧（oxygen-glucose deprivation and reoxygenation, OGD/R）后的神经保护作用及相关机制。方法 体外培养、纯化及鉴定Sprague-Dawley乳鼠皮层神经元，采用OGD/R模型，在体外模拟脑缺血/再灌注损伤。将培养7 d的神经元随机分为4组：正常组、OGD/R组、瘦素组和LY+瘦素组。采用细胞计数试
【基金项目】
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海南省自然科学基金青年基金项目（编号：819QN348）；
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目的 探讨瘦素预处理对原代培养神经元氧糖剥夺/复糖复氧（oxygen-glucose deprivation and reoxygenation, OGD/R）后的神经保护作用及相关机制。方法 体外培养、纯化及鉴定Sprague-Dawley乳鼠皮层神经元，采用OGD/R模型，在体外模拟脑缺血/再灌注损伤。将培养7 d的神经元随机分为4组：正常组、OGD/R组、瘦素组和LY+瘦素组。采用细胞计数试剂测定细胞存活率；通过透射电镜观察各组神经元的内质网超微结构；应用细胞免疫荧光、蛋白印迹技术及RT-PCR法检测磷酸化蛋白激酶B（phsphorylated protein kinase B,p-Akt）及内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）、C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）和半胱氨酸蛋白酶12（cysteinyl aspartate specific proteinase 12,Caspase12）的表达。结果 与OGD/R组比较，瘦素组细胞存活率明显升高（43.04%±1.17%vs. 68.61%±1.42%,P＜0.001），细胞的形态损伤与内质网肿胀明显减轻，p-Akt（0.65±0.10 vs. 1.10±0.21,P＜0.05）和GRP78（1.04±0.06 vs. 1.57±0.19,P＜0.01）表达显著增加，CHOP（1.00±0.21 vs. 0.59±0.11,P＜0.01）和Caspase12（1.20±0.10 vs. 0.86±0.10,P＜0.01）表达明显减少；与瘦素组比较，LY+瘦素组细胞存活率显著降低（68.61%±1.42%vs. 51.97%±2.05%,P＜0.001），细胞的形态损伤与内质网肿胀明显增加，p-Akt（1.10±0.21 vs. 0.76±0.23,P＜0.05）和GRP78（1.57±0.19 vs. 1.19±0.18,P＜0.05）表达减少，CHOP（0.59±0.11 vs. 0.65±0.33,P＜0.05）和Caspase12（0.86±0.10 vs. 1.03±0.06,P＜0.05）表达显著增加。结论 瘦素对OGD/R诱导的神经元损伤具有神经保护作用，其可能机制是瘦素激活PI3K/Akt信号通路，减轻内质网应激，从而促进原代神经元存活。
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