【摘 要】
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目的 探讨转录因子干扰素调节因子5（IRF5）对RAW264.7巨噬细胞极化的调控机制。方法 小鼠巨噬细胞（RAW264.7）被分为正常对照组、血管紧张素II（Ang II）处理组，IRF5 siRNA转染组，Ang II+IRF5 siRNA转染组，共4组。2’,7’-二氯荧光素二乙酸盐（DCHFDA）法测定巨噬细胞活性氧簇（ROS）的水平；免疫荧光染色方法检测细胞一氧化氮合酶（i NOS）和I
【基金项目】
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内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZY17113）； 内蒙古自治区蒙医蒙药协同创新中心项目（MYYXT202004）； 包头医学院科学基金项目（BYJJ-YF201692）； 内蒙古自然科学基金项目（2022MS08017,2019MS08194,2022LHMS08007）；
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目的 探讨转录因子干扰素调节因子5（IRF5）对RAW264.7巨噬细胞极化的调控机制。方法 小鼠巨噬细胞（RAW264.7）被分为正常对照组、血管紧张素II（Ang II）处理组，IRF5 siRNA转染组，Ang II+IRF5 siRNA转染组，共4组。2’,7’-二氯荧光素二乙酸盐（DCHFDA）法测定巨噬细胞活性氧簇（ROS）的水平；免疫荧光染色方法检测细胞一氧化氮合酶（i NOS）和IRF5的表达；试剂盒检测巨噬细胞丙二醛（MDA）含量；qRT-PCR和Wetern blotting分别检测巨噬细胞iNOS、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IRF5 mRNA表达水平，以及IRF5、髓样分化因子88（MyD88）、转化生长因子（TGF-β1）、Smad家族蛋白2/3（Smad-2/3）、磷酸化Smad家族蛋白2/3（p-Smad-2/3）蛋白的表达水平；ELISA法检测巨噬细胞培养上清炎症因子水平TNF-α、白介素12（IL-12）、IL-10含量变化。结果 IRF5干扰载体（IRF5 siRNA）显著抑制Ang II诱导的巨噬细胞中ROS的水平（P＜0.05）和MDA含量（P＜0.01）;IRF5 siRNA明显抑制Ang II促进巨噬细胞M1亚型的极化，IRF5 siRNA转染后可显著抑制Ang II诱导的巨噬细胞iNOS和TNF-α的表达，与此同时，IRF5表达的减少降低了MyD88/TGF-β1/Smads信号通路的活性；此外，IRF5 siRNA显著减弱Ang II组巨噬细胞培养上清中TNF-α和IL-12的分泌（均P＜0.01），而增加了IL-10含量（P＜0.001）。结论IRF5通过TLR-MyD88/TGF-β1/Smads信号通路调控巨噬细胞极化和炎症反应的诱发。
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