【摘 要】
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利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts882蛋白基因,测序结果表明:序列长度为270 bp,包含258 bp的编码区,编码85个氨基酸,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序
【机 构】
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河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州,450002;河南省农业科学院河南
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利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts882蛋白基因,测序结果表明:序列长度为270 bp,包含258 bp的编码区,编码85个氨基酸,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为99%;将该基因成熟肽部分亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,进行SDS-PAGE初步分析,在34 ku位置有1条蛋白条带,与预期结果一致.通过GST亲和纯化获得了较高纯度的重组融合蛋白,Western blot结果表明,纯化后的重组融合蛋白可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应.排泄分泌抗原Ts882的成功表达、纯化为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础.
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