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目的
建立双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泡状棘球蚴抗体的方法。
方法重组抗原Em18(rEm18)作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记rEm18抗原为检测抗原,建立检测人血清中泡状棘球蚴抗体的双抗原夹心ELISA方法;应用方阵滴定法对包被抗原、酶标抗原等条件进行优化,并对该系统的灵敏性、特异性、重复性进行初步分析评价。
结果rEm18最佳包被浓度为2.5 μg/mL,HRP标rEm18稀释度为1∶800。灵敏度为92%(46/50),特异性为94%(47/50),假阴性率为8%(4/50),假阳性率为6%(3/50),批内变异≤9.55% ,批间变异≤14.79%,与Em2-ELISA试剂盒检测结果有良好的一致性。
结论本研究成功建立了快速检测泡球蚴特异性抗体的ELISA法,其可以用于人泡球蚴病的早期诊断。