半乳糖基化壳聚糖肝靶向性基因转导的体内实验

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目的:研究半乳糖基化壳聚糖(Galactosylated chitosan,GC)在狗体内的肝靶向性作用.方法:GC与质粒pEGFP-N1混和制备成纳米微囊复合物,体外转染SMMC-7721细胞.杂种狗术前1 d静脉注射氯化钆(14 mg/kg)以清除Kupffer细胞.将含1 mg质粒的纳米微囊经肝动脉和门静脉注射入动物体内.48 h后取主要脏器组织做冰冻切片,在荧光显微镜下观察绿荧光蛋白表达情况.以裸质粒作为对照.结果:7721细胞中有绿荧光蛋白的表达,体内实验GC组肝组织中有绿荧光蛋白表达,其他脏器组织中仅有微量表达.结论:半乳糖基化壳聚糖在体外有较高的转染率,在大动物体内有肝靶向性作用,肝动脉、门静脉联合给药是基因治疗的一种有效途径.
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