探讨内毒素/脂多糖(LPS)通过PIM3对人中性粒细胞早期凋亡的影响。
方法采集1名健康成年志愿者静脉血，分离出中性粒细胞，采用随机数字表法分为对照组、LPS组、LPS＋PIM447组。对照组不行任何处理，LPS组采用1 μL 1 μg/mL的LPS刺激，LPS＋PIM447组在采用上述LPS刺激的前30 min，用1 μL终物质的量浓度为5 μmol/L的PIM447预干预30 min。常规培养1 h后，采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率，二氢罗丹明123荧光探针法检测细胞的活性氧生成水平，蛋白质印迹法检测细胞内PIM3的表达水平。常规培养2 h后，琼脂糖细胞趋化模型检测细胞趋化距离。以上4个实验每组样本数均为5。对数据行单因素方差分析、SNK检验。
结果(1)LPS组细胞早期凋亡率[(0.891±0.012)%]与对照组[(1.351±0.183)%]相近(P>0.05)，LPS＋PIM447组细胞早期凋亡率[(82.057±0.121)%]明显高于LPS组(P<0.01)。(2)LPS组细胞趋化距离[(984±5)μm]明显小于对照组[(2 241±7)μm，P<0.01]，LPS＋PIM447组细胞趋化距离[(1 785±11)μm]明显大于LPS组(P<0.05)。(3)LPS组细胞活性氧生成水平较对照组明显增加(P<0.05)，LPS＋PIM447组细胞活性氧生成水平较LPS组明显降低(P<0.05)。(4)LPS组细胞PIM3表达水平(1.297±0.015)较对照组(0.789±0.021)明显增加(P<0.05)，LPS＋PIM447组细胞PIM3表达水平(0.731±0.011)较LPS组明显降低(P<0.05)。
结论LPS刺激可以降低人中性粒细胞的早期凋亡，使用PIM447预干预可以明显增加LPS刺激后中性粒细胞的早期凋亡，恢复趋化功能，且很好地抑制活性氧的产生，其机制可能与LPS促进PIM3的表达有关。