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摘要：为了比较发酵床模式和传统水冲圈模式下生猪的猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫血清抗体的差异，于2012年11月以及2013年5月在江苏省阜宁县22个镇（区）分别采集生猪血样1 313份（发酵床602份）和1 235（发酵床563份）共计2 548份，用ELISA法检测血清中猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫抗体阳性率。结果显示：2012年11月和2013年5月发酵床模式下猪瘟血清抗体阳性率分别为97.7%、97.9%，略高于水冲圈的95.4%、96.0%；猪蓝耳病病毒血清抗体阳性率分别为65.3%、75.2%，高于水冲圈的50.2%、70.4%；口蹄疫血清抗体阳性率分别为95.2%、96.8%，与水冲圈的94.1%、99.1%基本持平。
关键词：发酵床；水冲圈；猪瘟；猪蓝耳病；口蹄疫；抗体检测；ELISA
中图分类号： S858.28文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）09-0178-02
收稿日期：2013-12-04
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（12）1001-05]。
作者简介：华利忠（1982—），男，江苏无锡人，博士，助理研究员，从事兽医传染病及兽医病理学研究。E-mail：[email protected]。
通信作者：邵国青，男，江苏盐城人，博士，研究员，主要从事兽医传染病学研究。E-mail：[email protected]。发酵床养猪法是近几年从日本、韩国引入的新型养猪方法[1]，是一种使用微生物垫料（锯末、稻壳、花生壳等含粗纤维高的物质中的2种或多种混合物，再加上复合微生物菌种）来养猪的方式[2]。有研究表明，与传统养猪模式相比，发酵床养猪可大大降低碳排放量和养殖成本，提高猪肉品质和养猪效益[3-4]，可是在疾病防控方面还有一些争论。一些研究表明，微生态发酵床内含有多类致病性细菌，对猪的健康具有潜在威胁，说明微生态发酵床养猪模式存在较大的安全隐患[5]；也有一些研究得出相反的结论，认为生物发酵床改善了猪舍环境，增强了猪的体况，提高了免疫效果，保障了猪群的健康[6-7]。目前，疫苗免疫是生猪疾病防控的主要措施之一，然而发酵床模式对生猪常规疫苗的免疫效率有何影响还没有研究；因此，本研究对江苏省阜宁县发酵床与传统水冲圈模式下猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后的血清抗体进行调查，探讨发酵床模式对猪常规疫苗免疫效率的影响。
1材料与方法
1.1主要试剂
猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒和猪蓝耳病病毒ELISA抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司；猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒购自上海优耐特生物医药有限公司。
1.2主要仪器
Denley Dragon Wellscan MK 3酶标仪（Ascent software for Multiskan分析软件，Thermo，芬兰），PYX-DHS数字显示隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂），微量反应板及封条（上海跃进医疗器械厂），TGL-168离心机（上海安亭科学仪器厂），10～1 000 μL移液枪及300 μL排枪（艾本德中国有限公司）。
1.3样本来源
分别于2012年11月和2013年5月采集江苏省阜宁县发酵床和传统水冲圈的生猪（50～75 kg/头）血样共2 548份，进行猪瘟、猪蓝耳病及猪口蹄疫血清抗体检测。其中，发酵床样品1 165份，水冲圈样品1 383份，样品情况详见表1。
1.4全血采集后的处理
每次抽血后倾斜45°于室温下放置30 min，立即放入有冰块的疫苗运输箱内，带回江苏省阜宁县畜牧兽医站，将血清倒入2 mL EP管中，5 000 r/min离心10 min，吸取上清移入另一干净的2 mL EP管中，做好标记，-20 ℃冰箱保存备用。
1.5血清抗体的检测
每批次样品全部采集完后，严格按相应试剂盒的操作说明进行猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫的血清抗体ELISA检测。
2结果与分析
由表2可知，发酵床模式下的猪蓝耳病抗体阳性率无论是2012年11月的65.3%，还是2013年5月的76.2%，均比同批次传统水冲圈模式下的高。猪瘟阳性率发酵床模式略高于传统水冲圈，口蹄疫抗体阳性率基本一致。同时还发现，2013年5月的抗体阳性率普遍比2012年11月高，但蓝耳病血清抗体阳性率普遍偏低，没有达到农业部的免疫标准。
3结论与讨论
发酵床养猪是依托日本、韩国自然养殖经验，并根据国内实际情况不断创新完善提出的一种环保、安全、有效的生态养猪法[8]。
然而，目前养猪界对发酵床在疫病防控方面仍然褒贬不一。一些研究认为，发酵床可以通过避免冲洗猪舍、猪粪和尿零排放、无臭味、无公害、环保等因素提高猪的免疫力和生产性能[11]。王诚等发现，发酵床模式能提高血清IgA、IgG含量以提高机体免疫力[12]；王志强等研究发现，发酵床猪舍能有效提高舍内环境温度和地面温度，并能显著降低猪舍的NH3含量，在寒冷季节通风条件差时能有效控制猪舍的氨气排放，有利于保持猪舍小环境空气质量和减少仔猪发病[13]。还有一些研究认为，发酵床容易引起霉菌毒素中毒、寄生虫病滋生[14-15]以及因木屑、米糠等粉状物引起的呼吸道疾病[16]。
猪瘟、蓝耳病和猪口蹄疫是生猪养殖常见的疫病[17-18]，也是国家强制免疫的3种猪主要疫病，目前主要靠疫苗免疫防控，所以进行猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后血清抗体的监测和分析，对防控这3种疫病具有重要的指导意义。而发酵床模式对生猪疫苗免疫效率的影响目前还未见报道，本研究通过对阜宁县发酵床养猪模式和传统水冲圈生猪猪瘟、蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后血清抗体的监测发现，发酵床模式下猪蓝耳病抗体阳性率、猪瘟阳性率比传统水冲圈高，口蹄疫抗体阳性率基本一致。同时还发现，对于免疫效率较差的蓝耳病疫苗，发酵床养猪有显著促进疫苗免疫保护率的作用；而对于疫苗保护率较好的猪瘟疫苗和口蹄疫疫苗，发酵表22012年11月和2013年5月水冲圈和发酵床模式下生猪血清抗体检测果
关键词：发酵床；水冲圈；猪瘟；猪蓝耳病；口蹄疫；抗体检测；ELISA
中图分类号： S858.28文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）09-0178-02
收稿日期：2013-12-04
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（12）1001-05]。
作者简介：华利忠（1982—），男，江苏无锡人，博士，助理研究员，从事兽医传染病及兽医病理学研究。E-mail：[email protected]。
通信作者：邵国青，男，江苏盐城人，博士，研究员，主要从事兽医传染病学研究。E-mail：[email protected]。发酵床养猪法是近几年从日本、韩国引入的新型养猪方法[1]，是一种使用微生物垫料（锯末、稻壳、花生壳等含粗纤维高的物质中的2种或多种混合物，再加上复合微生物菌种）来养猪的方式[2]。有研究表明，与传统养猪模式相比，发酵床养猪可大大降低碳排放量和养殖成本，提高猪肉品质和养猪效益[3-4]，可是在疾病防控方面还有一些争论。一些研究表明，微生态发酵床内含有多类致病性细菌，对猪的健康具有潜在威胁，说明微生态发酵床养猪模式存在较大的安全隐患[5]；也有一些研究得出相反的结论，认为生物发酵床改善了猪舍环境，增强了猪的体况，提高了免疫效果，保障了猪群的健康[6-7]。目前，疫苗免疫是生猪疾病防控的主要措施之一，然而发酵床模式对生猪常规疫苗的免疫效率有何影响还没有研究；因此，本研究对江苏省阜宁县发酵床与传统水冲圈模式下猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后的血清抗体进行调查，探讨发酵床模式对猪常规疫苗免疫效率的影响。
1材料与方法
1.1主要试剂
猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒和猪蓝耳病病毒ELISA抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司；猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒购自上海优耐特生物医药有限公司。
1.2主要仪器
Denley Dragon Wellscan MK 3酶标仪（Ascent software for Multiskan分析软件，Thermo，芬兰），PYX-DHS数字显示隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂），微量反应板及封条（上海跃进医疗器械厂），TGL-168离心机（上海安亭科学仪器厂），10～1 000 μL移液枪及300 μL排枪（艾本德中国有限公司）。
1.3样本来源
分别于2012年11月和2013年5月采集江苏省阜宁县发酵床和传统水冲圈的生猪（50～75 kg/头）血样共2 548份，进行猪瘟、猪蓝耳病及猪口蹄疫血清抗体检测。其中，发酵床样品1 165份，水冲圈样品1 383份，样品情况详见表1。
1.4全血采集后的处理
每次抽血后倾斜45°于室温下放置30 min，立即放入有冰块的疫苗运输箱内，带回江苏省阜宁县畜牧兽医站，将血清倒入2 mL EP管中，5 000 r/min离心10 min，吸取上清移入另一干净的2 mL EP管中，做好标记，-20 ℃冰箱保存备用。
1.5血清抗体的检测
每批次样品全部采集完后，严格按相应试剂盒的操作说明进行猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫的血清抗体ELISA检测。
2结果与分析
由表2可知，发酵床模式下的猪蓝耳病抗体阳性率无论是2012年11月的65.3%，还是2013年5月的76.2%，均比同批次传统水冲圈模式下的高。猪瘟阳性率发酵床模式略高于传统水冲圈，口蹄疫抗体阳性率基本一致。同时还发现，2013年5月的抗体阳性率普遍比2012年11月高，但蓝耳病血清抗体阳性率普遍偏低，没有达到农业部的免疫标准。
3结论与讨论
发酵床养猪是依托日本、韩国自然养殖经验，并根据国内实际情况不断创新完善提出的一种环保、安全、有效的生态养猪法[8]。
然而，目前养猪界对发酵床在疫病防控方面仍然褒贬不一。一些研究认为，发酵床可以通过避免冲洗猪舍、猪粪和尿零排放、无臭味、无公害、环保等因素提高猪的免疫力和生产性能[11]。王诚等发现，发酵床模式能提高血清IgA、IgG含量以提高机体免疫力[12]；王志强等研究发现，发酵床猪舍能有效提高舍内环境温度和地面温度，并能显著降低猪舍的NH3含量，在寒冷季节通风条件差时能有效控制猪舍的氨气排放，有利于保持猪舍小环境空气质量和减少仔猪发病[13]。还有一些研究认为，发酵床容易引起霉菌毒素中毒、寄生虫病滋生[14-15]以及因木屑、米糠等粉状物引起的呼吸道疾病[16]。
猪瘟、蓝耳病和猪口蹄疫是生猪养殖常见的疫病[17-18]，也是国家强制免疫的3种猪主要疫病，目前主要靠疫苗免疫防控，所以进行猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后血清抗体的监测和分析，对防控这3种疫病具有重要的指导意义。而发酵床模式对生猪疫苗免疫效率的影响目前还未见报道，本研究通过对阜宁县发酵床养猪模式和传统水冲圈生猪猪瘟、蓝耳病和猪口蹄疫疫苗免疫后血清抗体的监测发现，发酵床模式下猪蓝耳病抗体阳性率、猪瘟阳性率比传统水冲圈高，口蹄疫抗体阳性率基本一致。同时还发现，对于免疫效率较差的蓝耳病疫苗，发酵床养猪有显著促进疫苗免疫保护率的作用；而对于疫苗保护率较好的猪瘟疫苗和口蹄疫疫苗，发酵表22012年11月和2013年5月水冲圈和发酵床模式下生猪血清抗体检测果