【摘 要】
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目的:用dsRNA介导的RNA干扰(RNAi)特异性沉默烟曲霉色素形成相关基因arp1,使arp1基因mRNA水平降低,产生与母代绿色菌株不同的灰色菌株,类似基因敲除的表型.方法:液氮研磨烟曲霉,
【基金项目】
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陕西省自然科学基金项目(2004C2-64)
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目的:用dsRNA介导的RNA干扰(RNAi)特异性沉默烟曲霉色素形成相关基因arp1,使arp1基因mRNA水平降低,产生与母代绿色菌株不同的灰色菌株,类似基因敲除的表型.方法:液氮研磨烟曲霉,提取总mRNA,用含T7启动子序列的特异引物进行RT-pCR,扩增出两端含T7启动子序列的arp1基因,以此为模版使用MEGAscript RNAi Kit体外转录合成dsRNA,用合成的dsRNA电转化烟曲霉后,观察其表型变化,对转化菌进行RT-pCR,分析mRNA变化.结果:转化菌的arp1基因mRNA水平降
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