【摘 要】
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为建立一条简便、有效的构建哺乳动物细胞随机RNAi文库技术路线,首先通过PCR将19～21nt siRNA编码序列及终止信号等元件引入U6启动子下游,再将该扩增产物定向克隆至H1启动子的
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为建立一条简便、有效的构建哺乳动物细胞随机RNAi文库技术路线,首先通过PCR将19～21nt siRNA编码序列及终止信号等元件引入U6启动子下游,再将该扩增产物定向克隆至H1启动子的下游.构建的双启动子载体中,U6和H1相对排列,均以其间插入的靶序列为模板,分别转录出其正义和反义链,形成功能性siRNA.以EGFP和bcl-2为靶基因的实验表明,该方法构建的载体可有效地干扰相应基因的表达.
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