【摘 要】
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心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)是一种15 kDa的蛋白,涉及信号转导途径,参与长链脂肪酸的摄取及利用.本研究采用PCR技术扩增FABP3启动子序列,通过缺失分析构建了5个不同缺失片段
【机 构】
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天津市农业科学院畜牧兽医研究所,南开大学生命科学学院,天津农学院动物科学与动物医学学院
【基金项目】
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天津市农业科学院青年科研人员创新研究与实验项目(2021010),国家自然科学基金(31702095),天津市自然科学基金(18JCYBJC30200),中央引导地方科技发展专项(20ZYCGSN00030)。
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心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)是一种15 kDa的蛋白,涉及信号转导途径,参与长链脂肪酸的摄取及利用.本研究采用PCR技术扩增FABP3启动子序列,通过缺失分析构建了5个不同缺失片段荧光素酶报告基因载体,并转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测FABP3缺失片段启动子活性.结果表明:从奶山羊基因组中克隆得到2109 bp FABP3基因启动子序列(包括转录起始位点上游1985 bp),与牛(KJ649748.1)、猪(HM591296.1)和人(NG047049.1)的基因组序列同源性分别为90％、80％、75.08％.经转录因子在线软件预测分析发现,该启动子含有潜在的TATA框(TATA-box)、过氧化物酶增殖物激活受体反应元件(PPRE)、肝X受体反应元件(LXRE)、雌激素受体(ER)及两个环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的结合位点,分别位于-1632 bp和-189 bp.缺失突变研究发现,启动子片段-1801～+124活性最高,同时这一片段含有两个CREB结合位点,而当缺失至-80位点时,活性显著下降(P<0.05),且这一片段不包含CREB结合位点.表明CREB可能参与调控FABP3基因启动子的活性,为FABP3基因的转录调控研究提供理论依据.
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