【摘 要】
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目的:针对市场上出现的酸枣仁药材掺假现象,开发一种快速鉴别酸枣仁药材是否含有掺伪的方法。方法:基于多重连接探针扩增技术（MLPA）,针对酸枣仁与理枣仁ITS2序列205位点处A/G变异,以及枳椇子170位点分别设计酸枣仁、理枣仁与枳椇子的MLPA探针,MLPA扩增后依据熔解曲线Tm值差异来进行鉴别,并对其进行特异性、敏感度、掺伪比等方法学验证本方法的可行性。结果:酸枣仁、理枣仁和枳椇子分别与特异性
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81973429）； 湖北省科技重大专项（2020ACA007）； 湖北省自然科学基金重点类项目（2020CFA024）；
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目的:针对市场上出现的酸枣仁药材掺假现象,开发一种快速鉴别酸枣仁药材是否含有掺伪的方法。方法:基于多重连接探针扩增技术（MLPA）,针对酸枣仁与理枣仁ITS2序列205位点处A/G变异,以及枳椇子170位点分别设计酸枣仁、理枣仁与枳椇子的MLPA探针,MLPA扩增后依据熔解曲线Tm值差异来进行鉴别,并对其进行特异性、敏感度、掺伪比等方法学验证本方法的可行性。结果:酸枣仁、理枣仁和枳椇子分别与特异性探针在85.56℃、87.26℃和83.93℃处出现单一扩增峰,表明探针特异性好;通过不断稀释DNA模板,仍旧可以检测出0.05ng酸枣仁DNA量,同样酸枣仁中掺入10%的伪品均可被有效检出,表明本方法具有高灵敏度。结论:该研究建立的酸枣仁药材及其混伪品鉴别方法,具有特异性强、灵敏度高的特点对于解决酸枣仁药材掺伪问题具有重要意义。
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