日本血吸虫TOR真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gzqeedaa

【摘要】

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本研究扩增到日本血吸虫SjTOR完整的蛋白编码区并将其克隆到pXJ40-FLAG载体的HindⅢ、XhoⅠ酶切位点，构建真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR。将测序正确的质粒转染到293T细胞中进行

【作者】

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宰金丽马帅王涛贾秉光柴淑梅张倩林矫矫傅志强

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所

【出处】

：

中国动物传染病学报

【发表日期】

：

2017年1期

【关键词】

：

日本血吸虫 TOR蛋白基因克隆真核表达 Schistosoma japonicum TOR protein gene clone eukaryoti

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本研究扩增到日本血吸虫SjTOR完整的蛋白编码区并将其克隆到pXJ40-FLAG载体的HindⅢ、XhoⅠ酶切位点，构建真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR。将测序正确的质粒转染到293T细胞中进行表达，然后应用间接免疫荧光、实时荧光定量PCR、Westernblot检测其在293T细胞中的表达情况。测序结果表明SjTOR蛋白编码区为1245bp，真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR构建成功。转染293T细胞48h后，应用间接免疫荧光染色可观察到转染重组质粒的细胞有特异性绿色荧光，空质粒对照则未见

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