反相高效液相色谱法测定Bacillus claussi的DNA G+Cmol%

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目的:为了建立细菌DNA G+ Cmol%的快速准确的测定方法,选用反相高效液相色谱法测定Bacillus claussi DNA的G+C mol%.方法:以已完成全基因测序的Bacillus halodurans C-125作为标准菌株,作者实验室新分离鉴定的2株Bacillus claussi作为待测菌株.采用80%20mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH5.6)20%甲醇为移动相,检测波长260nm,流速1ml·min-1,在Kromasil C18柱上对4种碱基进行分离.结果:DNA碱基分离效果好,无杂峰干扰,以峰面积计算得到标准菌株Bacillus halodurans C-125的G+Cmol%为44.23%,待测菌株的G + Cmol%分别为45.75%、43.35%,经过统计学分析,与已经报道的G + Cmol%差异不显著.结论:实验结果充分显示高效反相液相色谱法测定细菌DNA G+ C mol%快速、准确、结果稳定,是细菌精确分类鉴定的一种可靠方法.
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