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中图分类号：R378.1+1
文献标识码： A
文章编号： 1672-3783(2008)-7-0102-03
【摘 要】目的 调查MRSA院内科室和标本来源的分布，为院感控制提供依据。方法 统计分析，进一步检验确认MRSA（PC20，头孢西丁纸片， PBP2a凝胶法）。结果 68 株金黄色葡萄球菌MRSA51株，占75%；MSSA17 株，占25%。其中，MRSA主要分布在ICU、脑外科（ICU）、骨科、烧伤科、心胸外科，分离自痰液标本32株，占总数的47.1%；脓液标本25株，占37.8%，分离出的MRSA对呋喃妥因、替考拉丁、力奈唑烷、万古霉素耐药率均为0%。头孢西丁药敏纸片法和PBP2a凝胶法与PC20无较大出入。结论 我院MRSA多耐药明显，对常用喹诺酮类的耐药性很高。由MRSA引起的呼吸道感染日趋严重，具体原因还需进一步调查分析，应加强对患者的隔离及环境的消毒，预防交叉传播。
【关键词】MRSA 院感 耐药 金黄色葡萄球菌
Investigation of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)
ZHENG hong
The First people’s Hospital of Zi yang,Zi yang 641300,Sichuan,China
【Abstract】Objective To investigate MRSA hospital departments and the distribution of Staphylococcus aureus to provide a basis for hospital infection control.Methods Recall additional data?and statistical analysis, further test and confirm MRSA(gram-positive PC20, cefoxitin disk, PBP2a gel). Results Of the 68 Staphylococcus aureus isolates, MRSA (51 strains) and MSSA (17 strains) accounted for 75% and 25% respectively, which, MRSA were mainly distributed in the ICU,?brain surgery(ICU),orthopedics, burn surgery and cardio-thoracic surgery. Samples isolated from Sputum were 32 strains, accounting for 47.1 percent; sanies 25 strains, accounting for 37.8 percent. Secretion. The resistant rate of the isolated MRSA to nitrofurantoin,teicoplanin, linezolid and vancomycin is 0 percent. There is no great difference between adopting cefoxitin disk and PBP2a gel.Conclusions Multidrug resistance for MRSA in our hospital is very obvious. MRSA shows a high-level resistance to commonly used quinolones. The respiratory tract infections caused by MRSA is increasingly serious. Specific analysis of the reasions needs further investigation. We should strengthen the isolation ofpatients and environment ronmental disinfectionto prevent cross-infection.
【Key words】MRSA; Hospital infection; Resistance; Staphylococcus aureus
金黄色葡萄球菌主要定植在人的鼻前庭、会阴部、新生儿脐带残端等,能引起肺、骨、心脏和血源的各种感染[1],是临床上常见的毒性较强的细菌，由于临床滥用抗生素或细菌耐药机制改变,金黄色葡萄球菌耐药率不断上升,1961年出现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,其对抗生素呈现多重耐药，并出现少量对万古霉素耐药的菌株。我院在最近几年由临床采集的金黄色葡萄球菌尤其是MRSA的检出率不断升高，耐药性呈现日趋严重且表现为多重耐药，为了解我院MRSA医院流行情况，收集我院2007年7月—2008年4月金黄色葡萄球菌对其进行分析，为临床感染控制和治疗提供依据。
1 材料及方法
1.1 菌株来源 (1) 临床分离株收集2007年7月—2008年4月我院住院患者送检标本中分离出金黄色葡萄球菌非重复株68株。(2) 药敏质控菌株 金黄色葡萄球菌 ATCC25923大肠埃希菌 ATCC25922铜绿假单胞菌 ATCC27853
1.2 仪器与试剂 德灵公司革兰阳性复合板PC20 及配套设备细菌比浊仪法国生物梅里埃MRSA乳胶凝集试剂盒
1.3 抗菌药物 头孢西丁纸片
1.4 方法
1.4.1 血浆凝固酶实验
1.4.1.1 培养基制备 将M-H琼脂粉按使用说明的剂量加入蒸馏水中溶解，然后经高压灭菌(125℃，0.15Mpa)15min，冷却至50℃左右，将其倾倒至直径9cm的一次性无菌平板中，每个平板约20ml。最后将配置好的M-H琼脂平板冷却后置于4℃冰箱中备用。
1.4.1.2 具体实验步骤 将保存的菌种从-40℃低温冰箱中取出，置室温下解冻后接种于M-H平板上，然后置于35℃温箱中培养18-24h，培养成单个菌落。挑取单个菌落，以无菌生理盐水调成0.5麦氏单位的菌悬液，加入1至无菌试管,再加入等量血浆,静置3-4小时,观察结果,血浆凝固为阳性。
1.4.2 头孢西丁纸片扩散法(K-B法)
1.4.2.1 具体实验步骤 挑取单个菌落，以无菌生理盐水调成0.5麦氏单位的菌悬液，用无菌棉签蘸取菌悬液，在试管内壁旋转挤去多余的菌液，然后在M-H琼脂培养基上均匀涂布，反复3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂一周。待室温下干燥后，用无菌镊子将纸片紧贴于琼脂表面。置35℃温箱中培养16-18h后读取结果。结果判断以2006年NCCLs出版的《药物敏感实验标准》。
1.4.3 革兰阳性复合板PC20 鉴定（按操作说明）
1.4.4 PBP2a凝集实验（按操作说明）
2 结果
血浆凝固酶均为阳性，OXOID头孢西丁药敏纸片法和PBP2a凝胶法与PC20无较大出入。
3 讨论
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA可产生一种额外的 由MecA基因编码的PBP, PBPa对β-2内酰胺类抗生素亲和力很低，而且在β-2内酰胺类抗生素存在的情况下能替代高亲和力 PBP使其不能作用, MRSA的耐药性与β-2内酰胺类抗生素的使用呈正相关,随着多种抗生素的使用，MRSA呈现多重耐药。近年来,MRSA检出率不断上升，张苏明[2]报道1999年MRSA占金黄色葡萄球菌的73.8%，2001年为 77.3%， 任南[3]报道2007年全国MRSA为79.93%，我院MRSA为75%，较全国略小。
本次调查显示，MRSA标本来源以痰液、脓液为主，占总MRSA88.2%，下呼吸道感染痰液分离培养出MRSA31株占总数61%，占感染第一位，与段秋林等报道一致[4]。
其中ICU、脑外(ICU)MRSA较集中，分离出25株，占MRSA总数的一半，全为痰液标本，提示与ICU科室病人多用呼吸机，实施气管插管等侵袭性操作破坏了正常的人体屏障,形成开放性创面使细菌容易侵入有很大关系，还可能与MRSA局部流行有关，但是否为造成医源性感染的主要原因，要通过DNA同源性分析。
桑福德热病学治疗MRSA经验采用环丙沙星或氧氟沙星，从本次统计可以看出，MRSA对环丙沙星及氧氟沙星耐药率达100%，这可能与各地区抗生素使用选择压力有关[5]。耐药率达80%以上的有氨苄西林、克林霉素、红霉素、青霉素、四环素、庆大霉素，低于40%的有氯霉素26.5%，利福平55.9%，复方新诺明39.7%，对呋喃妥因、替考拉丁、力奈唑烷、万古霉素敏感率均为 100 %,这说明万古霉素仍是目前治疗金黄色葡萄球菌感染最有效的药物。力奈唑烷是国内应用的最新的治疗耐万古霉素金黄色葡萄球菌的抗生素，还未发现耐药株。
参考文献
［1］ 徐秀华.临床医院感染学［M］.第2版.长沙:湖南科技出版社,2005,20.
［2］ ZHANG SM, ZHU LL, XU P. et al. Analysis of distribution of nosocomial infection pathogens and changing trend of antimicro- bial resistance［J］. Chin J Infect Control, 2002, 1(1): 44-46.
［3］ 任 南. 全国医院感染监控网对医院内金黄色葡萄球菌感染及耐药性监测报告,长沙:湖南.中国医学工程,2007, 15(5):425-427.
［4］ 段秋林,樊超英,方鹏,等. 基层医院金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析［J］. 中华医院感染学杂志,2005 ,15 (2) :1420 - 1421.
［5］ 吴超. 革兰阳性菌医院感染的现状和控制对策［J］.中华医院感染学杂志,2002 ,12 (2) :158
文献标识码： A
文章编号： 1672-3783(2008)-7-0102-03
【摘 要】目的 调查MRSA院内科室和标本来源的分布，为院感控制提供依据。方法 统计分析，进一步检验确认MRSA（PC20，头孢西丁纸片， PBP2a凝胶法）。结果 68 株金黄色葡萄球菌MRSA51株，占75%；MSSA17 株，占25%。其中，MRSA主要分布在ICU、脑外科（ICU）、骨科、烧伤科、心胸外科，分离自痰液标本32株，占总数的47.1%；脓液标本25株，占37.8%，分离出的MRSA对呋喃妥因、替考拉丁、力奈唑烷、万古霉素耐药率均为0%。头孢西丁药敏纸片法和PBP2a凝胶法与PC20无较大出入。结论 我院MRSA多耐药明显，对常用喹诺酮类的耐药性很高。由MRSA引起的呼吸道感染日趋严重，具体原因还需进一步调查分析，应加强对患者的隔离及环境的消毒，预防交叉传播。
【关键词】MRSA 院感 耐药 金黄色葡萄球菌
Investigation of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)
ZHENG hong
The First people’s Hospital of Zi yang,Zi yang 641300,Sichuan,China
【Abstract】Objective To investigate MRSA hospital departments and the distribution of Staphylococcus aureus to provide a basis for hospital infection control.Methods Recall additional data?and statistical analysis, further test and confirm MRSA(gram-positive PC20, cefoxitin disk, PBP2a gel). Results Of the 68 Staphylococcus aureus isolates, MRSA (51 strains) and MSSA (17 strains) accounted for 75% and 25% respectively, which, MRSA were mainly distributed in the ICU,?brain surgery(ICU),orthopedics, burn surgery and cardio-thoracic surgery. Samples isolated from Sputum were 32 strains, accounting for 47.1 percent; sanies 25 strains, accounting for 37.8 percent. Secretion. The resistant rate of the isolated MRSA to nitrofurantoin,teicoplanin, linezolid and vancomycin is 0 percent. There is no great difference between adopting cefoxitin disk and PBP2a gel.Conclusions Multidrug resistance for MRSA in our hospital is very obvious. MRSA shows a high-level resistance to commonly used quinolones. The respiratory tract infections caused by MRSA is increasingly serious. Specific analysis of the reasions needs further investigation. We should strengthen the isolation ofpatients and environment ronmental disinfectionto prevent cross-infection.
【Key words】MRSA; Hospital infection; Resistance; Staphylococcus aureus
金黄色葡萄球菌主要定植在人的鼻前庭、会阴部、新生儿脐带残端等,能引起肺、骨、心脏和血源的各种感染[1],是临床上常见的毒性较强的细菌，由于临床滥用抗生素或细菌耐药机制改变,金黄色葡萄球菌耐药率不断上升,1961年出现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,其对抗生素呈现多重耐药，并出现少量对万古霉素耐药的菌株。我院在最近几年由临床采集的金黄色葡萄球菌尤其是MRSA的检出率不断升高，耐药性呈现日趋严重且表现为多重耐药，为了解我院MRSA医院流行情况，收集我院2007年7月—2008年4月金黄色葡萄球菌对其进行分析，为临床感染控制和治疗提供依据。
1 材料及方法
1.1 菌株来源 (1) 临床分离株收集2007年7月—2008年4月我院住院患者送检标本中分离出金黄色葡萄球菌非重复株68株。(2) 药敏质控菌株 金黄色葡萄球菌 ATCC25923大肠埃希菌 ATCC25922铜绿假单胞菌 ATCC27853
1.2 仪器与试剂 德灵公司革兰阳性复合板PC20 及配套设备细菌比浊仪法国生物梅里埃MRSA乳胶凝集试剂盒
1.3 抗菌药物 头孢西丁纸片
1.4 方法
1.4.1 血浆凝固酶实验
1.4.1.1 培养基制备 将M-H琼脂粉按使用说明的剂量加入蒸馏水中溶解，然后经高压灭菌(125℃，0.15Mpa)15min，冷却至50℃左右，将其倾倒至直径9cm的一次性无菌平板中，每个平板约20ml。最后将配置好的M-H琼脂平板冷却后置于4℃冰箱中备用。
1.4.1.2 具体实验步骤 将保存的菌种从-40℃低温冰箱中取出，置室温下解冻后接种于M-H平板上，然后置于35℃温箱中培养18-24h，培养成单个菌落。挑取单个菌落，以无菌生理盐水调成0.5麦氏单位的菌悬液，加入1至无菌试管,再加入等量血浆,静置3-4小时,观察结果,血浆凝固为阳性。
1.4.2 头孢西丁纸片扩散法(K-B法)
1.4.2.1 具体实验步骤 挑取单个菌落，以无菌生理盐水调成0.5麦氏单位的菌悬液，用无菌棉签蘸取菌悬液，在试管内壁旋转挤去多余的菌液，然后在M-H琼脂培养基上均匀涂布，反复3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂一周。待室温下干燥后，用无菌镊子将纸片紧贴于琼脂表面。置35℃温箱中培养16-18h后读取结果。结果判断以2006年NCCLs出版的《药物敏感实验标准》。
1.4.3 革兰阳性复合板PC20 鉴定（按操作说明）
1.4.4 PBP2a凝集实验（按操作说明）
2 结果
血浆凝固酶均为阳性，OXOID头孢西丁药敏纸片法和PBP2a凝胶法与PC20无较大出入。
3 讨论
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA可产生一种额外的 由MecA基因编码的PBP, PBPa对β-2内酰胺类抗生素亲和力很低，而且在β-2内酰胺类抗生素存在的情况下能替代高亲和力 PBP使其不能作用, MRSA的耐药性与β-2内酰胺类抗生素的使用呈正相关,随着多种抗生素的使用，MRSA呈现多重耐药。近年来,MRSA检出率不断上升，张苏明[2]报道1999年MRSA占金黄色葡萄球菌的73.8%，2001年为 77.3%， 任南[3]报道2007年全国MRSA为79.93%，我院MRSA为75%，较全国略小。
本次调查显示，MRSA标本来源以痰液、脓液为主，占总MRSA88.2%，下呼吸道感染痰液分离培养出MRSA31株占总数61%，占感染第一位，与段秋林等报道一致[4]。
其中ICU、脑外(ICU)MRSA较集中，分离出25株，占MRSA总数的一半，全为痰液标本，提示与ICU科室病人多用呼吸机，实施气管插管等侵袭性操作破坏了正常的人体屏障,形成开放性创面使细菌容易侵入有很大关系，还可能与MRSA局部流行有关，但是否为造成医源性感染的主要原因，要通过DNA同源性分析。
桑福德热病学治疗MRSA经验采用环丙沙星或氧氟沙星，从本次统计可以看出，MRSA对环丙沙星及氧氟沙星耐药率达100%，这可能与各地区抗生素使用选择压力有关[5]。耐药率达80%以上的有氨苄西林、克林霉素、红霉素、青霉素、四环素、庆大霉素，低于40%的有氯霉素26.5%，利福平55.9%，复方新诺明39.7%，对呋喃妥因、替考拉丁、力奈唑烷、万古霉素敏感率均为 100 %,这说明万古霉素仍是目前治疗金黄色葡萄球菌感染最有效的药物。力奈唑烷是国内应用的最新的治疗耐万古霉素金黄色葡萄球菌的抗生素，还未发现耐药株。
参考文献
［1］ 徐秀华.临床医院感染学［M］.第2版.长沙:湖南科技出版社,2005,20.
［2］ ZHANG SM, ZHU LL, XU P. et al. Analysis of distribution of nosocomial infection pathogens and changing trend of antimicro- bial resistance［J］. Chin J Infect Control, 2002, 1(1): 44-46.
［3］ 任 南. 全国医院感染监控网对医院内金黄色葡萄球菌感染及耐药性监测报告,长沙:湖南.中国医学工程,2007, 15(5):425-427.
［4］ 段秋林,樊超英,方鹏,等. 基层医院金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析［J］. 中华医院感染学杂志,2005 ,15 (2) :1420 - 1421.
［5］ 吴超. 革兰阳性菌医院感染的现状和控制对策［J］.中华医院感染学杂志,2002 ,12 (2) :158