HCV/HBV复合抗原基因的克隆、表达及免疫应答研究

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duzitengnihaoma
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为探讨HCV/HBV 复合疫苗的可行性,将合成的丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位抗原基因PCX与HBsAg 基因连接成PCXS基因,与β-半乳糖苷酶(GZ)基因融合后在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得表达.目的蛋白GZ-PCXS可被抗-HBs 及抗-HCV 抗体所特异识别.GZ-PCXS抗原皮下注射免疫ICR小鼠后,诱发了较高水平的抗-GZ-PCXSIgG反应.构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(pWR/PCXS)口服免疫小鼠后,诱发了高水平的CD8+ T细胞增殖反应及抗GZ-PCXSIgG反应.所有免疫小鼠均未见明显的毒副作用.该研究揭示,HCV/HBV 复合抗原可诱发特异性体液免疫及细胞免疫应答,而活菌苗口服可能是理想的免疫途径,为HCV/HBV 双价疫苗研究提供了一定的理论及实验依据. In order to explore the feasibility of HCV / HBV combination vaccine, PCX and HBsAg genes were cloned into PCXS gene and fused with β-galactosidase (GZ) Escherichia coli and attenuated Salmonella typhimurium expression. The target protein GZ-PCXS can be specifically recognized by anti-HBs and anti-HCV antibodies. Subcutaneously immunization of ICR mice with GZ-PCXS antigen induced a higher level of anti-GZ-PCXSIgG response. The constructed recombinant attenuated Salmonella typhimurium SL3261 (pWR / PCXS) orally immunized mice, induced a high level of CD8 + T cell proliferation and anti-GZ-PCXSIgG response. All immunized mice showed no obvious side effects. The study revealed that HCV / HBV composite antigen can induce specific humoral and cellular immune responses. However, oral administration of live bacterins may be an ideal route of immunization and provide some theoretical and experimental evidences for the study of HCV / HBV bivalent vaccine.
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