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【摘要】目的探讨干化学法对尿液中白细胞(WBC)检测的筛查作用。方法 尿干化学分析仪使用迪瑞H-100分析仪,尿沉渣镜检使用奥林巴斯显微镜和台式离心机,检测1120份尿液标本,对尿液白细胞的检测结果进行比较分析。结果 在1120份标本中,干化学法阳性人数为100例,阳性率为8.9%,镜检法阳性人数为162例,阳性率为14.46%。结论 两种方法检测尿液结果有一定的差异,干化学法检测尿WBC为阴性不可免去镜检,阳性结果必须镜检。
【关键词】干化学法;显微镜检查法;白细胞
随着尿液分析仪的广泛使用,干化学法白细胞测定已成为尿液检验常规项目,为临床尿液分析节省了大量的人力和物力。迄今尚无一台仪器能完全替代显微镜检查,只起到显微镜检查的筛查作用[1]。不同的检测方法由于实验原理不同,结果也存在一定差异。干化学法操作简单、快速,但受到一些因素影响,可造成WBC的假阳性和假阴性[2]。笔者对临床就诊的1120例患者尿样标本用干化学分析法和尿沉渣镜检法进行了对比分析,实验结果和结论报告如下。
1资料与方法
1.1标本来源收集我院2009年3月—2009年4月门诊及住院患者和健康体检者的随机尿液1120份于1 h内检测完成,患者年龄20~52岁,平均30.5岁。其中男422例,女798例。
1.2仪器与试剂干化学法:长春迪瑞有限公司生产的H-100型尿十项分析仪及配套的尿十项试纸条。镜检法:日本产OLymPus显微镜,台式离心机,10 mL尖底离心管,玻片等。
1.3质控检测物使用黑龙江省临检中心统一尿液质控物。
1.4 测定方法
1.4.1干化学法:每天用质控物进行质控合格后方可进行患者标本的测定,取新鲜尿液10 mL,混匀,完全浸没检测试纸条,立即取出并轻轻拭去残余尿液,将试纸条放于仪器内自动完成检测。结果报告为:-、±、+、++、+++、++++。检测结果+以上为阳性。
1.4.2 镜检法:取混匀尿液10 ml于试管中,以1 500 r/min,5 min离心,弃上清液留0.2 ml尿液,混匀,高倍镜计数10个视野,以高倍镜视野所见的最低至最高值报告结果。WBC参考范围:WBC<(0~5)/HP。为方便表述结果,以细胞数小于正常参考范围为阴性,大于或等于正常参考范围为阳性。
2结果
2.1结果判断标准人工镜检结果阳性标准:WBC >5个/HP。干化学法阳性标准:WBC>15/μl,以试纸条测出一个+或更多具有临床意义)。
2.2实验结果1120例标本用两种方法进行尿液检测,结果,白细胞:干化学法阳性人数为100例,阳性率为8.9%,镜检法阳性人数为162例,阳性率为14.46%,两种方法测定白细胞结果用χ2检验,χ2=3.88,P<0.05,两种检验方法差异有统计学意义
3讨论
本次实验共检测1120份尿液标本,其中尿干化学法WBC阳性人数100例,阳性率为8.9%,镜检法阳性人数为162例,阳性率为14.46%,两种方法的阳性率差别较大,数据经统计学处理后显示尿沉渣镜检法阳性率高于干化学法。由于试纸模块上的白细胞检测原理是基于中性粒细胞浆内的酯酶作用于模块中的吡咯酚酯,而白细胞中的其他细胞如单核细胞、淋巴细胞等均不与此反应[3],故造成一定的漏检,此外,由于上皮细胞具有与白细胞相似的酯酶,能造成假阳性,所以两种方法各有所长,应相互结合。由于干化学模块中检测白细胞只属于间接反应,具有中性粒细胞浆中酯酶反应的特异性,其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈比例关系,但它不与淋巴细胞、单核细胞起反应,故某些以淋巴细胞、单核细胞感染为主的疾病可以出现尿检与临床不符的现象[4]。本实验观测到46例标本,WBC试纸模块阴性而镜检阳性的现象,占总样本的4.1%,若不借助显微镜镜检,易造成漏检。在日常工作中笔者还发现干化学法测定女性尿样标本白细胞阳性率高于男性,而经离心后镜检发现大量上皮细胞,这是由于女者尿样受到阴道分泌物污染,而上皮细胞内含有与中性粒相似酯酶,故引起假阳性。此外,尿中含有大量先锋Ⅳ或庆大霉素、尿蛋白大于5 g/L、乳糜尿及深棕色尿均可导致尿白细胞阳性减弱或呈假阴性;免疫性疾病或肾移植术后发生排斥时尿液中白细胞常以淋巴细胞为主,因其无粒细胞酯酶而出现假阴性结果。沉渣镜检法由于采还可在显微镜下直观分析白细胞,既避免了尿液中单核细胞、淋巴细胞与试纸带模块不反应造成的假阴性结果,还避免了上皮细胞造成的假阳性结果。然而,由于沉渣镜检法直接观察白细胞形态,因此当尿液pH值变化或渗透压等其他因素造成白细胞崩解时将导致假阴性结果[5]。在1120份标本中,共检测到22例干化学阳性镜检阴性的标本占总样本的1.96%。应嘱患者去除干扰因素后重新测定。
由此可见,干化学法和尿沉渣镜检法因检测原理的差异,其检测性能各有优缺点,因此分析尿液白细胞时应将干化学法和尿沉渣镜检法结合起来,其结果相互补充和印证,从而获得准确可靠的实验结果。
参考文献
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:296.
[2]王修银,朱秀梅,赖沛炼.尿液常规干化学检验的影响因素分析[J].中国实用医药,2006,1(1):35-37.
[3]朱辰,王鹏飞,杨琛.尿干化学法及尿沉渣镜检等手工法对2005年浙江省军校招生体检尿液中部分成分的对比分析.中国疗养医学,2006,15(3):231.
[4]袁玉德,张显达,张文陆.两种尿沉渣定量检测结果差异原因分析.中华医学检验杂志,2005,28(7):753-754.
[5]曾嵘,彭祥云.尿液分析仪检测尿中白细胞的影响因素[J].实用医技杂志,2007,14(21):2909-2910.
【关键词】干化学法;显微镜检查法;白细胞
随着尿液分析仪的广泛使用,干化学法白细胞测定已成为尿液检验常规项目,为临床尿液分析节省了大量的人力和物力。迄今尚无一台仪器能完全替代显微镜检查,只起到显微镜检查的筛查作用[1]。不同的检测方法由于实验原理不同,结果也存在一定差异。干化学法操作简单、快速,但受到一些因素影响,可造成WBC的假阳性和假阴性[2]。笔者对临床就诊的1120例患者尿样标本用干化学分析法和尿沉渣镜检法进行了对比分析,实验结果和结论报告如下。
1资料与方法
1.1标本来源收集我院2009年3月—2009年4月门诊及住院患者和健康体检者的随机尿液1120份于1 h内检测完成,患者年龄20~52岁,平均30.5岁。其中男422例,女798例。
1.2仪器与试剂干化学法:长春迪瑞有限公司生产的H-100型尿十项分析仪及配套的尿十项试纸条。镜检法:日本产OLymPus显微镜,台式离心机,10 mL尖底离心管,玻片等。
1.3质控检测物使用黑龙江省临检中心统一尿液质控物。
1.4 测定方法
1.4.1干化学法:每天用质控物进行质控合格后方可进行患者标本的测定,取新鲜尿液10 mL,混匀,完全浸没检测试纸条,立即取出并轻轻拭去残余尿液,将试纸条放于仪器内自动完成检测。结果报告为:-、±、+、++、+++、++++。检测结果+以上为阳性。
1.4.2 镜检法:取混匀尿液10 ml于试管中,以1 500 r/min,5 min离心,弃上清液留0.2 ml尿液,混匀,高倍镜计数10个视野,以高倍镜视野所见的最低至最高值报告结果。WBC参考范围:WBC<(0~5)/HP。为方便表述结果,以细胞数小于正常参考范围为阴性,大于或等于正常参考范围为阳性。
2结果
2.1结果判断标准人工镜检结果阳性标准:WBC >5个/HP。干化学法阳性标准:WBC>15/μl,以试纸条测出一个+或更多具有临床意义)。
2.2实验结果1120例标本用两种方法进行尿液检测,结果,白细胞:干化学法阳性人数为100例,阳性率为8.9%,镜检法阳性人数为162例,阳性率为14.46%,两种方法测定白细胞结果用χ2检验,χ2=3.88,P<0.05,两种检验方法差异有统计学意义
3讨论
本次实验共检测1120份尿液标本,其中尿干化学法WBC阳性人数100例,阳性率为8.9%,镜检法阳性人数为162例,阳性率为14.46%,两种方法的阳性率差别较大,数据经统计学处理后显示尿沉渣镜检法阳性率高于干化学法。由于试纸模块上的白细胞检测原理是基于中性粒细胞浆内的酯酶作用于模块中的吡咯酚酯,而白细胞中的其他细胞如单核细胞、淋巴细胞等均不与此反应[3],故造成一定的漏检,此外,由于上皮细胞具有与白细胞相似的酯酶,能造成假阳性,所以两种方法各有所长,应相互结合。由于干化学模块中检测白细胞只属于间接反应,具有中性粒细胞浆中酯酶反应的特异性,其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈比例关系,但它不与淋巴细胞、单核细胞起反应,故某些以淋巴细胞、单核细胞感染为主的疾病可以出现尿检与临床不符的现象[4]。本实验观测到46例标本,WBC试纸模块阴性而镜检阳性的现象,占总样本的4.1%,若不借助显微镜镜检,易造成漏检。在日常工作中笔者还发现干化学法测定女性尿样标本白细胞阳性率高于男性,而经离心后镜检发现大量上皮细胞,这是由于女者尿样受到阴道分泌物污染,而上皮细胞内含有与中性粒相似酯酶,故引起假阳性。此外,尿中含有大量先锋Ⅳ或庆大霉素、尿蛋白大于5 g/L、乳糜尿及深棕色尿均可导致尿白细胞阳性减弱或呈假阴性;免疫性疾病或肾移植术后发生排斥时尿液中白细胞常以淋巴细胞为主,因其无粒细胞酯酶而出现假阴性结果。沉渣镜检法由于采还可在显微镜下直观分析白细胞,既避免了尿液中单核细胞、淋巴细胞与试纸带模块不反应造成的假阴性结果,还避免了上皮细胞造成的假阳性结果。然而,由于沉渣镜检法直接观察白细胞形态,因此当尿液pH值变化或渗透压等其他因素造成白细胞崩解时将导致假阴性结果[5]。在1120份标本中,共检测到22例干化学阳性镜检阴性的标本占总样本的1.96%。应嘱患者去除干扰因素后重新测定。
由此可见,干化学法和尿沉渣镜检法因检测原理的差异,其检测性能各有优缺点,因此分析尿液白细胞时应将干化学法和尿沉渣镜检法结合起来,其结果相互补充和印证,从而获得准确可靠的实验结果。
参考文献
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:296.
[2]王修银,朱秀梅,赖沛炼.尿液常规干化学检验的影响因素分析[J].中国实用医药,2006,1(1):35-37.
[3]朱辰,王鹏飞,杨琛.尿干化学法及尿沉渣镜检等手工法对2005年浙江省军校招生体检尿液中部分成分的对比分析.中国疗养医学,2006,15(3):231.
[4]袁玉德,张显达,张文陆.两种尿沉渣定量检测结果差异原因分析.中华医学检验杂志,2005,28(7):753-754.
[5]曾嵘,彭祥云.尿液分析仪检测尿中白细胞的影响因素[J].实用医技杂志,2007,14(21):2909-2910.