【摘 要】
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目的:研究大黄素对脂多糖(LPS)诱导炎症反应的抑制作用及分子机制.方法:CCK8检测大黄素对RAW264.7的最佳给药浓度;以LPS刺激RAW264.7细胞制备体外炎症模型,随机分为对照组、L
【机 构】
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南京中医药大学附属南京中医院肛肠中心,南京 210000;上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院,上海 200437
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目的:研究大黄素对脂多糖(LPS)诱导炎症反应的抑制作用及分子机制.方法:CCK8检测大黄素对RAW264.7的最佳给药浓度;以LPS刺激RAW264.7细胞制备体外炎症模型,随机分为对照组、LPS组(LPS 1μg/ml)、大黄素低剂量组(LPS 1μg/ml+大黄素20μmol/L)和大黄素高剂量组(LPS 1μg/ml+大黄素40μmol/L),实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞因子IL-6、iNOS、IL-1βmRNA的表达情况;Griess法检测各组NO含量;流式细胞术检测各组细胞内ROS的含量和细胞表面膜蛋白CD86阳性表达率;Western blot法检测大黄素干预RAW264.7后Nrf-2和HO-1的蛋白表达.同时检测大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞MAPK信号通路的影响.结果:CCK8结果显示,大黄素对RAW264.7细胞无明显毒副作用;大黄素呈剂量依赖地抑制由LPS诱导RAW264.7细胞中细胞因子IL-6、iNOS、IL-1βmRNA的表达量和NO含量;大黄素能明显抑制由LPS引起的RAW264.7细胞的ROS增多,且能够对LPS诱导RAW264.7细胞的膜蛋白CD86具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性;大黄素对LPS诱导的Nrf-2/HO-1通路具有明显的抑制作用,并且对MAPK通路具有明显的抑制作用.结论:大黄素能调节Nrf-2/HO-1和MAPK信号通路,抑制由LPS诱导的RAW264.7细胞炎症和氧化应激.
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