【摘 要】
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目的探讨上调Rap1GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响，并构建白血病动物模型验证体外实验的结果。方法采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞（空载体对照组）及Rap1GAP过表达单克隆细胞株Rap1GAP/HL-60(R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平，Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力，
【机 构】
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215006 苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所（现在徐州医学院附属医院血液科221002）,徐州医学院附属医院血液科,徐州医学院附属医院血液科,徐州医学院附属医院血液科,215006 苏州大学附
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目的探讨上调Rap1GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响，并构建白血病动物模型验证体外实验的结果。
方法采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞（空载体对照组）及Rap1GAP过表达单克隆细胞株Rap1GAP/HL-60(R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平，Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力，实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达，并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性；将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞，观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况。
结果R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍，侵袭率分别为（55±5）%、（59±4）%，显著高于空载体对照组的（14±4）%（P值均<0.001）。R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加，约为空载体对照组的12.0倍。动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠（R1组）生存时间为（32.00±1.85） d, R2组为（33.37±2.50）d，空载体对照组为（43.62±2.32） d，R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短（P<0.05）。R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润，脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因，空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显。
结论Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力，同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高，裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力。
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