论文部分内容阅读
摘要:目的:探讨乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP)与HBV复制的关系。
方法:对305例乙肝患者进行HBV血清标志物、HBV-LP、HBV-PreS1和HBV-DNA的测定,并对结果作分析。
结果:HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1的阳性检出率(P<0.005);HBV-LP与HBV-DNA有较高相关性(r=0.948,P<0.005)。
结论:HBV-LP与HBV-DNA呈正相关,较之PreS1,HBV-LP可以更好地反映HBV的复制情况。
关键词:HBV-LPHBV-DNAHBV-PreS1
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2013)11-0040-01
乙型肝炎血清标志物是HBV感染、病程监测及预后评估的主要指标。为探讨HBV-LP对乙肝的诊治价值,我们对305例住院及门诊患者的HBV-LP、HBV-M及PreS1-Ag进行检测,并与HBV-DNA的检测结果比较,旨在为乙肝的诊断、监测复制及预后评估提供依据。
1材料和方法
1.1材料。选择2012年7月~2012年10月间来金乡县人民医院住院及门诊的305例乙肝患者的血清作为检测标本,另以24例HBV标志物阴性的体检者的血清作为正常对照。
1.2仪器与试剂。仪器:芬兰Labsystems Dragon公司的Wellscan MK3全自动酶免分析仪;Roche公司的Light Cycler480荧光定量PCR仪。试剂:HBV M检测试剂HBV-LP检测试剂;HBV-PreS1抗原检测试剂;HBV-DNA定量检测试剂;所有试剂均在有效期内使用。
1.3检测方法与结果判定。HBV-LP检测采用ELISA双抗体夹心法,定量时用定值标准品0、10、25、50、100、200ng/ml,由全自动酶免分析仪测定结果。
1.4统计学处理。采用SPSS12.0统计软件包。HBV-LP与HBV-PreS1抗原的检出率比较采用X2检验;HBV-LP与HBV-DNA检测结果的相关性采用直线相关分析。
2结果
2.1HBV血清标志物阴性者的HBV-LP、HBV-PreS1及HBV-DNA的检测。24例HBV血清标志物阴性者的HBV-LP、HBV-PreS1及HBV-DNA的检测结果均为阴性。
2.2乙型肝炎患者血清HBV-LP及HBV-PreS1抗原的检测。305例HBV-DNA阳性者根据HBV标志物模式的不同分为HBeAg(+)组和HBeAg(-)组,两组HBV-LP及HBV-PreS1抗原的检测结果见表1。
从表1可见,305例HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1的阳性检出率(X2=92.83,P<0.005)。
2.3乙肝患者血清HBV-LP与HBV-DNA的检测。将305例HBV-DNA阳性的标本按DNA量的高低分为6组,即102组、103组、104组、105组、106组、及≥107组,测定每组标本HBV-LP的OD值,取其平均数,将HBV-DNA取对数作为X轴,HBV-LP OD平均数作为Y轴作散点图,见图1。
由图1可见,随着HBV-DNA含量的增加HBV-LP的OD值也逐渐增加,经直线相关分析二者之间高度相关(r=0.948,P<0.005)。
3讨论
乙肝病毒包膜蛋白由HBV基因组S区编码,S区分为S基因、preS1基因和preS2基因,可以形成S蛋白(S基因编码)、M蛋白(preS2+S基因编码)和L蛋白(preS1+preS2+S基因编码)。L蛋白的PreS部分通过翻译后转位(post-translational translocation)机制以病毒包膜内和外膜外两种拓扑形式存在于包膜上[1]。L蛋白主要存在于Dane颗粒和管形颗粒表面,与HBV的存在和复制关系密切[2,3]。
结果显示,HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1抗原的阳性检出率,二者之间存在显著性差异(P<0.005)。乙肝病毒的L蛋白是构象型蛋白,具有复杂的拓扑结构。而PreS1蛋白是L蛋白的一部分,无法模拟L蛋白PreS区的复杂拓扑结构,这样获得的单克隆抗体的检测准确率下降,导致临床检测结果并不能反映病毒复制情况。
HBV-DNA是HBV复制的直接依据。由于HBeAg阳性血清几乎都有HBV-DNA的存在,故认为HBeAg是除外HBV-DNA的一个很重要的复制指标。
HBV-LP主要在乙肝的急性期出现,其相对含量的消长可以提示乙肝的预后,阴转越早,预后越好。检测HBV-LP抗原,可以弥补目前血清学指标检测的空白,与基因检测相得益彰。
HBV-LP的检测不受医疗水平的影响,其有效、直接、简便的特点,在各个层次的实验室均可开展,故在中小医院HBV-LP是反映乙肝传染性的很好指标。
参考文献
[1]Carsten Lambere, Sylvia Mann, Reinhild Prange.Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral large envelope proteins[J].Journal of General Virology, 2004, 85:1221-1225
[2]徐蓓, 姚光弼.血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系[J].中华实验和临床病毒学杂志, 1997, 11(2):117
[3]崔鲂, 胥飚, 陈宏础.乙型肝炎血清标志物、前S抗原与病毒载量的关系及意义[J].江西医学检验, 2004, 22(6):498-500
方法:对305例乙肝患者进行HBV血清标志物、HBV-LP、HBV-PreS1和HBV-DNA的测定,并对结果作分析。
结果:HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1的阳性检出率(P<0.005);HBV-LP与HBV-DNA有较高相关性(r=0.948,P<0.005)。
结论:HBV-LP与HBV-DNA呈正相关,较之PreS1,HBV-LP可以更好地反映HBV的复制情况。
关键词:HBV-LPHBV-DNAHBV-PreS1
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2013)11-0040-01
乙型肝炎血清标志物是HBV感染、病程监测及预后评估的主要指标。为探讨HBV-LP对乙肝的诊治价值,我们对305例住院及门诊患者的HBV-LP、HBV-M及PreS1-Ag进行检测,并与HBV-DNA的检测结果比较,旨在为乙肝的诊断、监测复制及预后评估提供依据。
1材料和方法
1.1材料。选择2012年7月~2012年10月间来金乡县人民医院住院及门诊的305例乙肝患者的血清作为检测标本,另以24例HBV标志物阴性的体检者的血清作为正常对照。
1.2仪器与试剂。仪器:芬兰Labsystems Dragon公司的Wellscan MK3全自动酶免分析仪;Roche公司的Light Cycler480荧光定量PCR仪。试剂:HBV M检测试剂HBV-LP检测试剂;HBV-PreS1抗原检测试剂;HBV-DNA定量检测试剂;所有试剂均在有效期内使用。
1.3检测方法与结果判定。HBV-LP检测采用ELISA双抗体夹心法,定量时用定值标准品0、10、25、50、100、200ng/ml,由全自动酶免分析仪测定结果。
1.4统计学处理。采用SPSS12.0统计软件包。HBV-LP与HBV-PreS1抗原的检出率比较采用X2检验;HBV-LP与HBV-DNA检测结果的相关性采用直线相关分析。
2结果
2.1HBV血清标志物阴性者的HBV-LP、HBV-PreS1及HBV-DNA的检测。24例HBV血清标志物阴性者的HBV-LP、HBV-PreS1及HBV-DNA的检测结果均为阴性。
2.2乙型肝炎患者血清HBV-LP及HBV-PreS1抗原的检测。305例HBV-DNA阳性者根据HBV标志物模式的不同分为HBeAg(+)组和HBeAg(-)组,两组HBV-LP及HBV-PreS1抗原的检测结果见表1。
从表1可见,305例HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1的阳性检出率(X2=92.83,P<0.005)。
2.3乙肝患者血清HBV-LP与HBV-DNA的检测。将305例HBV-DNA阳性的标本按DNA量的高低分为6组,即102组、103组、104组、105组、106组、及≥107组,测定每组标本HBV-LP的OD值,取其平均数,将HBV-DNA取对数作为X轴,HBV-LP OD平均数作为Y轴作散点图,见图1。
由图1可见,随着HBV-DNA含量的增加HBV-LP的OD值也逐渐增加,经直线相关分析二者之间高度相关(r=0.948,P<0.005)。
3讨论
乙肝病毒包膜蛋白由HBV基因组S区编码,S区分为S基因、preS1基因和preS2基因,可以形成S蛋白(S基因编码)、M蛋白(preS2+S基因编码)和L蛋白(preS1+preS2+S基因编码)。L蛋白的PreS部分通过翻译后转位(post-translational translocation)机制以病毒包膜内和外膜外两种拓扑形式存在于包膜上[1]。L蛋白主要存在于Dane颗粒和管形颗粒表面,与HBV的存在和复制关系密切[2,3]。
结果显示,HBV-DNA阳性标本中HBV-LP的阳性检出率明显高于HBV-PreS1抗原的阳性检出率,二者之间存在显著性差异(P<0.005)。乙肝病毒的L蛋白是构象型蛋白,具有复杂的拓扑结构。而PreS1蛋白是L蛋白的一部分,无法模拟L蛋白PreS区的复杂拓扑结构,这样获得的单克隆抗体的检测准确率下降,导致临床检测结果并不能反映病毒复制情况。
HBV-DNA是HBV复制的直接依据。由于HBeAg阳性血清几乎都有HBV-DNA的存在,故认为HBeAg是除外HBV-DNA的一个很重要的复制指标。
HBV-LP主要在乙肝的急性期出现,其相对含量的消长可以提示乙肝的预后,阴转越早,预后越好。检测HBV-LP抗原,可以弥补目前血清学指标检测的空白,与基因检测相得益彰。
HBV-LP的检测不受医疗水平的影响,其有效、直接、简便的特点,在各个层次的实验室均可开展,故在中小医院HBV-LP是反映乙肝传染性的很好指标。
参考文献
[1]Carsten Lambere, Sylvia Mann, Reinhild Prange.Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral large envelope proteins[J].Journal of General Virology, 2004, 85:1221-1225
[2]徐蓓, 姚光弼.血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系[J].中华实验和临床病毒学杂志, 1997, 11(2):117
[3]崔鲂, 胥飚, 陈宏础.乙型肝炎血清标志物、前S抗原与病毒载量的关系及意义[J].江西医学检验, 2004, 22(6):498-500