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【摘要】目的对全自动血液分析仪XE-5000未成熟粒细胞计数(IG)与显微镜方法的一致性、重复性进行比较。方法500例血液标本(IG>0.1×109∕L)同时用XE-5000和显微镜计数IG。结果全自动血液分析仪XE-5000检测结果为7.48±5.55%,与镜检结果无显著差异,P>0.05,差异无统计学意义。结论全自动血液分析仪XE-5000对未成熟粒细胞的检验结果与显微镜检验结果差异不大,可以在临床检验工作中应用。
【关键词】XE-5000全自动血液分析仪;显微镜检查;未成熟粒细胞计数
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.07.714文章编号:1004-7484(2013)-07-4093-01
未成熟粒细胞,即幼稚粒细胞(immature granulocyte,IG),它包含了早幼粒细胞、中幼粒细胞和晚幼粒细胞,一般在正常情况下,未成熟粒细胞仅存在于骨髓内,一旦成熟后才会进入到外周血液内[1]。因此,如果在外周血中出现未成熟粒细胞则提示有骨髓造血功能的异常增生,提示患者出现了有类白反应、感染性疾病、血液系统疾病等[2]。为更好地提高临床对未成熟粒细胞的检验水平,本文研究分析了全自动血液分析仪XE-5000与显微镜检测未成熟粒细胞的差异,报告如下:
1资料与方法
1.1仪器与试剂日本Sysmex公司XE-5000全自动血液分析仪及配套试剂,美国BD公司EDTA-K2真空采血管。日本OLYMPUS CX-41型显微镜用于白细胞显微镜分类计数。
1.2标本来源选择2012年3月——2013年3月我院住院患者血常规标本经XE-5000检测出未成熟粒细胞超过0.1×109∕L的标本500例,其中,男280例,女220例,同一标本制备2张血涂片(A和B)。
1.3XE-5000未成熟粒细胞计数原理采用半导体激光技术,依据每个细胞产生的前向散射光、側向散射光及侧向荧光对血细胞进行识别。该仪器在原有的白细胞分类通道中增加了IG通道,用自动阈值鉴别线把未成熟粒细胞从成熟粒细胞中自动区分出来。IG用IMI溶血素,白细胞用STROMA TOL YSER2 4DS染色,这种聚次甲基染料可进入细胞使RNA和DNA着色。未成熟粒细胞的DNA比成熟粒细胞多,通常有较强的荧光信号,能被光电倍增管检测到。在白细胞分类通道中幼稚粒细胞群被标记成深蓝色,仪器可报告幼稚粒细胞(IG)绝对值和百分数[3]。
1.4显微镜计数法血涂片用瑞-姬染色,严格按照临床检验操作规程进行操作,由两个专业技术人员分别对A、B两张血涂片进行显微镜分类计数,每张血涂片计数200个白细胞,IG的百分数为(A+B/4)。
1.5观察指标观察比较全自动血液分析仪XE-5000与显微镜检测未成熟粒细胞百分数的差异,未成熟粒细胞的百分数包括早幼粒细胞百分数、中幼粒细胞百分数和晚幼粒细胞百分数之和。
1.6数据处理本次实验的所有数据处理均采用SPSS19.0软件包进行处理,检验水准α为0.05,以95%为可信区间,计算结果中P<0.05时,为样本差异明显且有统计学意义。其中未成熟粒细胞为计量资料,组间对比方法为t检验。
2结果
从表1中我们可以看出,全自动血液分析仪XE-5000检测结果为7.48±5.55%,显微镜计数结果为6.89±5.98%,t=1.52,P=0.889>0.05,XE-5000检测结果与镜检结果无显著差异,差异无统计学意义。说明使用全自动血液分析仪XE-5000对未成熟粒细胞的检验结果可信。
3讨论
对外周血白细胞总数及分类计数是一般血液检查的重点内容。其中粒细胞主要起源于骨髓粒系祖细胞,其首先经历原粒细胞,随后为早幼粒细胞、中幼粒细胞,最后为晚幼粒细胞,再发展为杆状核粒细胞、分叶核粒细胞。一般在成人外周血中有杆状核粒细胞、分叶核粒细胞。一旦出现有未成熟粒细胞,就表示患者的骨髓增生情况存在异常。未成熟粒细胞的计数通常是将血液制品作为血涂片,再通过瑞-姬染色,在显微镜进行计数,其所需人力和时间均较大,耗时长,工作繁琐。近年来随着高档次血液分析仪在白细胞分类上的进展,大多数标本能得到较准确、可靠的分类结果,起到很好的筛检效果,同时,利用激光技术、特殊染色技术、流式细胞术等新技术,对异常白细胞进行一定程度的报警作用[4]。
一般情况下,显微镜检测未成熟粒细胞是比较精准的。全自动血液分析仪XE-5000检查的结果越是和显微镜检查的结果相近。说明检测的精确度越高。仪器利用激光技术、流式细胞技术和荧光染色技术,可以有效地对白细胞进行计数和分类。其中前向散射光可以表示细胞内容物的复杂情况,侧向荧光能够表示出白细胞的核酸含量。侧向荧光强度信号还可以显示出细胞内核糖核酸及脱氧核糖核酸的含量。通过三个信号对细胞的分类计数,可以提高整体的准确性与精密度。
从表1中我们也可以看出,血常规检测仪检查结果为7.48±5.55%,与镜检结果无显著差异,P>0.05,差异无统计学意义。说明使用XE-5000对未成熟粒细胞的检验价值也较高。
但是,尽管使用XE-5000对未成熟粒细胞进行检验是临床发展的方向,其能够有效地解决涂片镜检的费力费时缺点。但是,由于血细胞的形态变化较多,血液分析仪不能完全取代涂片检查的形态学观察特点。例如,在粒细胞发生胞体增大和细胞核肿胀等情况时,其电阻抗和荧光信号及散射光会出现有不规则的改变,这样导致散点图出现明显的变化,会超出仪器预设的范围,检验报告中就会出现不能分类及分类不完全现象。
综上所述,血常规检测仪XE-5000对未成熟粒细胞的检验结果与显微镜检验结果差异不大,可以在临床检验工作中应用推广。
参考文献
[1]曹增,李勇,幕悦意,等.血细胞分析仪白细胞分类性能评价[J].中国血液流变学杂志,2009,19(4):643-645,671.
[2]毕燕玲,黄美群,宁秋,等.血液分析仪复检规则的改进与临床应用[J].广东医学,2012,33(11):1578-1580.
[3]日本Sysmex公司.全自动血液分析仪XE-5000中文操作手册[Z].2007修订版,代码461-2644-9.
[4]王小林,王宇,等.全自动血液分析仪幼稚粒细胞计数与显微镜方法比较[J].现代检验医学杂志,2006,21(6):1671-7414,62.
【关键词】XE-5000全自动血液分析仪;显微镜检查;未成熟粒细胞计数
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.07.714文章编号:1004-7484(2013)-07-4093-01
未成熟粒细胞,即幼稚粒细胞(immature granulocyte,IG),它包含了早幼粒细胞、中幼粒细胞和晚幼粒细胞,一般在正常情况下,未成熟粒细胞仅存在于骨髓内,一旦成熟后才会进入到外周血液内[1]。因此,如果在外周血中出现未成熟粒细胞则提示有骨髓造血功能的异常增生,提示患者出现了有类白反应、感染性疾病、血液系统疾病等[2]。为更好地提高临床对未成熟粒细胞的检验水平,本文研究分析了全自动血液分析仪XE-5000与显微镜检测未成熟粒细胞的差异,报告如下:
1资料与方法
1.1仪器与试剂日本Sysmex公司XE-5000全自动血液分析仪及配套试剂,美国BD公司EDTA-K2真空采血管。日本OLYMPUS CX-41型显微镜用于白细胞显微镜分类计数。
1.2标本来源选择2012年3月——2013年3月我院住院患者血常规标本经XE-5000检测出未成熟粒细胞超过0.1×109∕L的标本500例,其中,男280例,女220例,同一标本制备2张血涂片(A和B)。
1.3XE-5000未成熟粒细胞计数原理采用半导体激光技术,依据每个细胞产生的前向散射光、側向散射光及侧向荧光对血细胞进行识别。该仪器在原有的白细胞分类通道中增加了IG通道,用自动阈值鉴别线把未成熟粒细胞从成熟粒细胞中自动区分出来。IG用IMI溶血素,白细胞用STROMA TOL YSER2 4DS染色,这种聚次甲基染料可进入细胞使RNA和DNA着色。未成熟粒细胞的DNA比成熟粒细胞多,通常有较强的荧光信号,能被光电倍增管检测到。在白细胞分类通道中幼稚粒细胞群被标记成深蓝色,仪器可报告幼稚粒细胞(IG)绝对值和百分数[3]。
1.4显微镜计数法血涂片用瑞-姬染色,严格按照临床检验操作规程进行操作,由两个专业技术人员分别对A、B两张血涂片进行显微镜分类计数,每张血涂片计数200个白细胞,IG的百分数为(A+B/4)。
1.5观察指标观察比较全自动血液分析仪XE-5000与显微镜检测未成熟粒细胞百分数的差异,未成熟粒细胞的百分数包括早幼粒细胞百分数、中幼粒细胞百分数和晚幼粒细胞百分数之和。
1.6数据处理本次实验的所有数据处理均采用SPSS19.0软件包进行处理,检验水准α为0.05,以95%为可信区间,计算结果中P<0.05时,为样本差异明显且有统计学意义。其中未成熟粒细胞为计量资料,组间对比方法为t检验。
2结果
从表1中我们可以看出,全自动血液分析仪XE-5000检测结果为7.48±5.55%,显微镜计数结果为6.89±5.98%,t=1.52,P=0.889>0.05,XE-5000检测结果与镜检结果无显著差异,差异无统计学意义。说明使用全自动血液分析仪XE-5000对未成熟粒细胞的检验结果可信。
3讨论
对外周血白细胞总数及分类计数是一般血液检查的重点内容。其中粒细胞主要起源于骨髓粒系祖细胞,其首先经历原粒细胞,随后为早幼粒细胞、中幼粒细胞,最后为晚幼粒细胞,再发展为杆状核粒细胞、分叶核粒细胞。一般在成人外周血中有杆状核粒细胞、分叶核粒细胞。一旦出现有未成熟粒细胞,就表示患者的骨髓增生情况存在异常。未成熟粒细胞的计数通常是将血液制品作为血涂片,再通过瑞-姬染色,在显微镜进行计数,其所需人力和时间均较大,耗时长,工作繁琐。近年来随着高档次血液分析仪在白细胞分类上的进展,大多数标本能得到较准确、可靠的分类结果,起到很好的筛检效果,同时,利用激光技术、特殊染色技术、流式细胞术等新技术,对异常白细胞进行一定程度的报警作用[4]。
一般情况下,显微镜检测未成熟粒细胞是比较精准的。全自动血液分析仪XE-5000检查的结果越是和显微镜检查的结果相近。说明检测的精确度越高。仪器利用激光技术、流式细胞技术和荧光染色技术,可以有效地对白细胞进行计数和分类。其中前向散射光可以表示细胞内容物的复杂情况,侧向荧光能够表示出白细胞的核酸含量。侧向荧光强度信号还可以显示出细胞内核糖核酸及脱氧核糖核酸的含量。通过三个信号对细胞的分类计数,可以提高整体的准确性与精密度。
从表1中我们也可以看出,血常规检测仪检查结果为7.48±5.55%,与镜检结果无显著差异,P>0.05,差异无统计学意义。说明使用XE-5000对未成熟粒细胞的检验价值也较高。
但是,尽管使用XE-5000对未成熟粒细胞进行检验是临床发展的方向,其能够有效地解决涂片镜检的费力费时缺点。但是,由于血细胞的形态变化较多,血液分析仪不能完全取代涂片检查的形态学观察特点。例如,在粒细胞发生胞体增大和细胞核肿胀等情况时,其电阻抗和荧光信号及散射光会出现有不规则的改变,这样导致散点图出现明显的变化,会超出仪器预设的范围,检验报告中就会出现不能分类及分类不完全现象。
综上所述,血常规检测仪XE-5000对未成熟粒细胞的检验结果与显微镜检验结果差异不大,可以在临床检验工作中应用推广。
参考文献
[1]曹增,李勇,幕悦意,等.血细胞分析仪白细胞分类性能评价[J].中国血液流变学杂志,2009,19(4):643-645,671.
[2]毕燕玲,黄美群,宁秋,等.血液分析仪复检规则的改进与临床应用[J].广东医学,2012,33(11):1578-1580.
[3]日本Sysmex公司.全自动血液分析仪XE-5000中文操作手册[Z].2007修订版,代码461-2644-9.
[4]王小林,王宇,等.全自动血液分析仪幼稚粒细胞计数与显微镜方法比较[J].现代检验医学杂志,2006,21(6):1671-7414,62.