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目的构建GAD65真核表达载体,并分析其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。方法从SD大鼠脑中提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增GAD65基因,测序鉴定后将GAD65基因克隆入pCDNA3.1中,构建真核表达载体pCDNA3.1-GAD65;原代培养大鼠间充质干细胞,以脂质体介导法将构建好的重组真核表达载体pCD.NA3.1-GAD65转染至间充质干细胞;RT—PCR、细胞免疫荧光、Westernblot检测GAD65在间充质干细胞中的表达。结果扩增的大鼠GAD65基因序列与GenBbank的参考序列完全-