【摘 要】
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根据GenBank传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因序列,设计合成了1对特异性引物.以ILTV DNA为模板,建立了检测ILTV的PCR检测方法.通过优化PCR反应条件,成功扩增出一条约690bp的目的
【机 构】
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河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南农业大学牧医工程学院
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根据GenBank传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因序列,设计合成了1对特异性引物.以ILTV DNA为模板,建立了检测ILTV的PCR检测方法.通过优化PCR反应条件,成功扩增出一条约690bp的目的基因片段.而鸡传染性法氏囊病病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒基因组均未扩增为出相应的片段.敏感性试验检测出其DNA最小检出量为10-2μg.重复性试验中对3份检测为传染性喉气管炎病毒阳性病料进行检测,发现3次重复检测的结果完全一致.临床应用中运用上述优化的PCR反应条件进行PCR检测临床送检的16份疑似鸡传染性喉气管炎病毒感染病料,结果显示检出阳性样品6份,将阳性样品的PCR扩增产物克隆后序列分析显示均为鸡传染性喉气管炎病毒.结果表明,建立的PCR方法具有良好的特异性,敏感性和稳定性,可应用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断.
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