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摘 要:本文以仙客来为例,详细介绍了组织培养的材料,方法以及愈伤组织诱导。从而进一步体现了组织培养的理论价值和商业价值。
关键词:仙客来;组织培养;价值
Abstract: in this paper, the Cyclamen as an example, introduces in detail the methods and materials of tissue culture, callus induction. Thus further embodies the organization culture theory value and commercial value.
Keywords: Cyclamen; tissue culture; value
中图分类号:J522.3
仙客来(Cyclamen persicum Mill)。报春花科仙客来属植物,多年生草本,多在元旦、春节期间开花,花姿奇特优美,是很有发展潜力的盆花植物。目前,仙客来繁殖多用种子进行繁殖,且种子多为杂交种,不利于优良性状的保持。组织培养能够保持植物的优良性状并且有很高的繁殖率,仙客来组织培养培养基配方的研究具有很高的基础理论价值和商业价值。
1材料与方法
1.1材料
取自花圃仙客来实生苗,仙客来叶片和叶柄作为外植体。实验于2007年9月份在组培室开始进行。
1.2方法
将从花圃采取的仙客来叶片(带有一段叶柄)放在自来水下冲洗5分钟,然后用洗洁净清洗,自来水冲洗干净。将洗净的叶片拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒,迅速放入0.1%升汞溶液中消毒10分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。然后无菌水冲洗5次,每次5分钟左右。最后将材料放在消毒纸上处理。
愈伤组织诱导
愈伤组织的诱导分两个步骤:初选和复选。初选的培养基配方如下:
经过初选重复2次后确定复选配方。复选的培养基配方如下:
复选重复3次,从而确定诱导愈伤组织的培养基配方。
芽的诱导
把分别由2,4-D和NAA诱导得到的愈伤组织转入分化培养基中,进行芽的诱导,基本培养基设MS和N6两种。培养基配方如下:
1.2.3根的诱导
把诱导得到的芽转入以下生根培养基中,进行生根试验。
2结果与分析
2.1 愈伤组织诱导情况
初选时MA1—MA11培养基诱导情况统计如下表:
经过初选可知在应用2,4-D的培养基中,MA2 、MA3两种较好;在应用NAA的培养基中,MA8、 MA9较好。根据初选情况确定复选的培养基配方为MB1 —M B6。实验结果表明应用2,4-D的最适浓度,叶片和叶柄均为2mg/L;应用NAA的诱导,叶片为2.5mg/L,叶柄为3.0mg/L。由此也能看出叶片比叶柄易于诱导,应用2,4-D比应用NAA的诱导率高。
另外,在试验过程中还发现叶柄比叶片不耐表面灭菌剂。叶柄内输导组织发达,灭菌剂易于随着水溶液进入组织,所以灭菌后接入培养基,叶柄很容易死亡。
2.2 芽诱导情况
将由2,4-D和NAA诱导出的愈伤组织转入MC1—N636种分化培养基中,其诱导情况统计如下表:
根据实验结果可知,2,4-D在诱导芽的过程中所起到的生长素的作用是必不可少的。
2.3生根情況
将诱导出的芽转接到MR1—M R4这4种生根培养基中,试验情况统计如下表:
从试验结果可以知道,IBA比NAA对仙客来的生根更有效;另外,微量的细胞分裂素6-BA对其生根有促进作用。
3总结
在仙客来的组织培养中,应用2,4-D和NAA都能得到愈伤组织,2,4-D的诱导率高于NAA,而且由2,4-D诱导得到的愈伤组织生长速度比由NAA诱导得到的快。在分化试验中,基本培养基MS比N6更适合;2,4-D在诱导芽的过程中所起到的生长素的作用是必不可少的。生根培养中,IBA与NAA相比,IBA对仙客来生根更有效;微量的细胞分裂素6-BA对其生根有利。另外,由试验可知,叶片与叶柄相比,叶片更利于器官分化,是较适宜的外植体。
关键词:仙客来;组织培养;价值
Abstract: in this paper, the Cyclamen as an example, introduces in detail the methods and materials of tissue culture, callus induction. Thus further embodies the organization culture theory value and commercial value.
Keywords: Cyclamen; tissue culture; value
中图分类号:J522.3
仙客来(Cyclamen persicum Mill)。报春花科仙客来属植物,多年生草本,多在元旦、春节期间开花,花姿奇特优美,是很有发展潜力的盆花植物。目前,仙客来繁殖多用种子进行繁殖,且种子多为杂交种,不利于优良性状的保持。组织培养能够保持植物的优良性状并且有很高的繁殖率,仙客来组织培养培养基配方的研究具有很高的基础理论价值和商业价值。
1材料与方法
1.1材料
取自花圃仙客来实生苗,仙客来叶片和叶柄作为外植体。实验于2007年9月份在组培室开始进行。
1.2方法
将从花圃采取的仙客来叶片(带有一段叶柄)放在自来水下冲洗5分钟,然后用洗洁净清洗,自来水冲洗干净。将洗净的叶片拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒,迅速放入0.1%升汞溶液中消毒10分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。然后无菌水冲洗5次,每次5分钟左右。最后将材料放在消毒纸上处理。
愈伤组织诱导
愈伤组织的诱导分两个步骤:初选和复选。初选的培养基配方如下:
经过初选重复2次后确定复选配方。复选的培养基配方如下:
复选重复3次,从而确定诱导愈伤组织的培养基配方。
芽的诱导
把分别由2,4-D和NAA诱导得到的愈伤组织转入分化培养基中,进行芽的诱导,基本培养基设MS和N6两种。培养基配方如下:
1.2.3根的诱导
把诱导得到的芽转入以下生根培养基中,进行生根试验。
2结果与分析
2.1 愈伤组织诱导情况
初选时MA1—MA11培养基诱导情况统计如下表:
经过初选可知在应用2,4-D的培养基中,MA2 、MA3两种较好;在应用NAA的培养基中,MA8、 MA9较好。根据初选情况确定复选的培养基配方为MB1 —M B6。实验结果表明应用2,4-D的最适浓度,叶片和叶柄均为2mg/L;应用NAA的诱导,叶片为2.5mg/L,叶柄为3.0mg/L。由此也能看出叶片比叶柄易于诱导,应用2,4-D比应用NAA的诱导率高。
另外,在试验过程中还发现叶柄比叶片不耐表面灭菌剂。叶柄内输导组织发达,灭菌剂易于随着水溶液进入组织,所以灭菌后接入培养基,叶柄很容易死亡。
2.2 芽诱导情况
将由2,4-D和NAA诱导出的愈伤组织转入MC1—N636种分化培养基中,其诱导情况统计如下表:
根据实验结果可知,2,4-D在诱导芽的过程中所起到的生长素的作用是必不可少的。
2.3生根情況
将诱导出的芽转接到MR1—M R4这4种生根培养基中,试验情况统计如下表:
从试验结果可以知道,IBA比NAA对仙客来的生根更有效;另外,微量的细胞分裂素6-BA对其生根有促进作用。
3总结
在仙客来的组织培养中,应用2,4-D和NAA都能得到愈伤组织,2,4-D的诱导率高于NAA,而且由2,4-D诱导得到的愈伤组织生长速度比由NAA诱导得到的快。在分化试验中,基本培养基MS比N6更适合;2,4-D在诱导芽的过程中所起到的生长素的作用是必不可少的。生根培养中,IBA与NAA相比,IBA对仙客来生根更有效;微量的细胞分裂素6-BA对其生根有利。另外,由试验可知,叶片与叶柄相比,叶片更利于器官分化,是较适宜的外植体。