【摘 要】
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提取鸭骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ (skeletal muscle troponin Ⅰ,sTnI)用于制备单克隆抗体,并对抗体性能进行评价.将鸭骨骼肌提取后经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dode
【机 构】
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河北省科学院生物研究所,河北石家庄,050081;秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛,066001
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提取鸭骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ (skeletal muscle troponin Ⅰ,sTnI)用于制备单克隆抗体,并对抗体性能进行评价.将鸭骨骼肌提取后经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)测定,取凝胶条带免疫小鼠,融合后经筛选获得分泌抗鸭sTnI的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测抗体效价、亚型及特异性等特性.结果 表明:鸭骨骼肌提取物经SDS-PAGE后出现2条颜色较深的条带,取分子质量24 kDa条带用于免疫;筛选后获得2株单克隆抗体,其中3E7特异性较好,效价在1:1.0×105以上,为IgG1亚型,亲和常数(K)为5.9×105 L/mol;免疫印迹结果显示,抗体3E7能与鸭骨骼肌提取物反应,与牛、羊、鸡、鱼骨骼肌提取物无明显反应.
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