副溶血弧菌感染12h和24h杂色鲍肝脏全长cDNA文库的构建

来源 :中国水产科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：reap

【摘要】

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采用RDP试剂提取杂色鲍(Haliotis diversicolor)不同免疫时相肝脏的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)原理,

【作者】

：

王艺磊张子平戴军邹志华王淑红

【机构】

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集美大学,美国密歇根州立大学

【出处】

：

中国水产科学

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

杂色鲍 CDNA文库 SMART 免疫时相肝脏 Haliotis diversicolor cDNA library SMART immunological

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采用RDP试剂提取杂色鲍(Haliotis diversicolor)不同免疫时相肝脏的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)原理,利用含sfiIB酶切位点的Oligo(dT)引物合成cDNA第1条链,利用含sfiIA酶切位点的SMARTⅢ寡核苷酸作为cDNA第1条链在mRNA5′端延伸出去的模板,采用LD-PCR引物合成双链cDNA.双链cDNA用sfiI酶切和过柱分级分离后,与λ

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