【摘 要】
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【目的】ExpiCHO细胞瞬时表达能够快速有效地生产重组蛋白,为筛选有效的重组蛋白节省了大量的时间,细胞系的选择、表达载体的选择、转染试剂的选择等是制约ExpiCHO细胞瞬时表
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,国家兽用药品工程技术研究中心
【基金项目】
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河南省重大科技项目(181200211700)
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【目的】ExpiCHO细胞瞬时表达能够快速有效地生产重组蛋白,为筛选有效的重组蛋白节省了大量的时间,细胞系的选择、表达载体的选择、转染试剂的选择等是制约ExpiCHO细胞瞬时表达蛋白的重要因素,本研究旨在筛选出在CHO细胞中瞬时表达量较高的载体。【方法】以GFP基因作为目的基因,用不同的真核表达载体构建GFP重组质粒,瞬时转染ExpiCHO-S细胞。转染后4 d观察不同载体表达GFP的荧光数量和强度;转染后8 d对细胞进行裂解,收获裂解上清,用SDS-PAGE对不同载体的表达量进行鉴定。同时用His Tr
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