缺氧诱导因子-1α shRNA重组质粒的构建及对人结肠癌细胞生长的影响

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目的构建靶向缺氧诱导因子-1α特异性短发卡RNA(shRNA)的真核表达载体,为结肠癌的靶向治疗奠定基础。方法设计、合成针对缺氧诱导因子-1α的特异性短链寡核苷酸,构建缺氧诱导因子-1α特异性shR—NA的重组质粒,稳定转染结肠癌SW480细胞;采用氯化钴制备缺氧诱导培养基,模拟肿瘤缺氧状态。采用实时定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后SW480细胞中缺氧诱导因子-1α的表达;MTT法检测SW480细胞活性。结果经酶切和测序鉴定,成功构建HIF-1α特异性shRNA的重组质粒,并能转染SW480细胞。
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