α-1抗胰蛋白酶对肝窦内皮细胞缺氧-复氧损伤保护作用的实验研究

来源 :中华医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caculate
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨α1抗胰蛋白酶对人肝窦内皮细胞(LSEC)冷缺氧复氧损伤的保护作用。方法人LSEC在体外培养,通过低温、缺氧复氧建立缺氧复氧损伤实验模型,观察α1抗胰蛋白酶对LSEC缺氧复氧损伤的影响。细胞凋亡应用原位免疫组织化学和DNA梯状条带方法检测;产生基质金属蛋白酶(MMP)的活性应用酶谱方法分析;一氧化氮的产生通过检测亚硝酸盐含量进行分析;一氧化氮合酶的表达采用细胞免疫组织化学方法进行分析。结果低温、缺氧复氧引起LSEC凋亡,而α1抗胰蛋白酶抑制LSEC的凋亡。应用一氧化氮的抑制剂Nω硝基左旋精氨酸(LNAME)或MMP的抑制剂BB3103明显减少缺氧复氧诱导的LSEC的凋亡,而应用外源性一氧化氮的供体S亚硝基N乙酰青霉氨(SNAP)则明显增加LSEC的凋亡,表明一氧化氮和MMP在LSEC凋亡过程中是重要的介导物。在缺氧复氧过程中,一氧化氮合酶表达增强,一氧化氮产生增多,产生MMP的活性增强。α1抗胰蛋白酶明显抑制缺氧复氧过程中MMP的释放,并通过抑制一氧化氮合酶的表达减少一氧化氮的产生。结论α1抗胰蛋白酶通过抑制一氧化氮和MMP的产生保护LSEC的冷缺氧复氧损伤。 Objective To investigate the protective effect of α1 antitrypsin on cold anoxia-reoxygenation injury in human hepatic sinusoidal endothelial cells (LSECs). METHODS: Human LSECs were cultured in vitro and hypoxic-reoxygenation injury was induced by hypoxia and reoxygenation. The effects of α1 antitrypsin on hypoxic-reoxygenation injury were observed. Apoptosis was detected by in situ immunohistochemistry and DNA ladder method. The activity of matrix metalloproteinases (MMPs) was analyzed by zymography. Nitric oxide production was analyzed by detecting nitrite content. Nitric oxide Synthase expression was analyzed by cellular immunohistochemistry. Results Low temperature hypoxia and reoxygenation induced apoptosis of LSEC, while α1 antitrypsin inhibited the apoptosis of LSEC. Nitric oxide inhibitor Nω-nitro-L-arginine (LNAME) or MMP inhibitor BB3103 significantly reduced hypoxia-reoxygenation-induced apoptosis of LSEC, while application of exogenous nitric oxide donor S nitrosamine N-acetyl penicillamine (SNAP) significantly increased the apoptosis of LSEC, suggesting that nitric oxide and MMPs are important mediators in LSEC apoptosis. During hypoxia and reoxygenation, the expression of nitric oxide synthase increased, the production of nitric oxide increased, and the activity of producing MMP increased. α1 antitrypsin significantly inhibits MMP release during hypoxia-reoxygenation and decreases nitric oxide production by inhibiting nitric oxide synthase expression. Conclusion α1 antitrypsin protects cold-hypoxia-reoxygenation injury of LSEC by inhibiting the production of nitric oxide and MMPs.
其他文献
利用早熟染色体凝集技术预测研究了γ射线对肝癌细胞SMMC7721的辐射效应。结果表明,G1和G2期细胞内的染色单体和等点染色单体断裂数与照射剂量之间存在线性相关性,染色单体断
背景:纤维连结蛋白(Fibronection,FN)在炎症中起修复作用,能否用于治疗顽固性角膜上皮缺损,尚无定论.目的:观察人血浆纤维连结蛋白(FN)对顽固性角膜上皮缺损的修复作用.设计:
患者,女,23岁,主因“发热、腹胀、四肢麻木、无力4月余”于2003年10月20日入院。患者于2003年6月4日生食西红柿后出现腹泻、腹痛、腹胀、呕吐,伴发热,在学校医务室予氟哌酸口
α-地中海贫血(简称α-地贫)是世界上最常见的人类单基因遗传性血液病.我国长江以南也是该病的高发区,广东和广西两省区的人群基因携带率高达8.53﹪~11.19﹪.已阐明95﹪以上的α-地
目的介绍逆行肱桡肌肌皮瓣修复前臂远端及腕部软组织缺损的手术方法。方法通过对2 0侧新鲜成人尸体上肢标本的应用解剖学研究,观测到肱桡肌有三组供血系统,由近及远分别为桡
目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B亚单位(SEB)对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治作用机制。方法实验供体为30只Fisher344和4只Lewis大鼠,受体为64只Lewis大鼠。将实
目的 探讨儿童重度先天性上睑下垂早期手术治疗方法。方法 采用改良的双切口提上睑肌腱膜瓣 -额肌吻合术治疗 15例 (2 2眼 )重度先天性上睑下垂合并遮蔽性弱视的患儿 ,年龄
目的 探讨子宫肌瘤动脉栓塞术 (UAE)后的病理学变化。方法  1 999年 6月至 2 0 0 3年 1 0月对广州市第一人民医院 4 86例子宫肌瘤患者行UAE治疗 ,栓塞剂选择PVA或KMG颗粒 ,
目的:观察含谷氨酰胺二肽的新型20种氨基酸注射液(20AA)对创伤大鼠静脉营养支持7天的效用. 方法:将24只Wistar大鼠行创伤和中心静脉置管手术后,随机分成17AA组、18AA组、20AA
目的 观察血小板活化因子受体拮抗剂WEB2 0 86对载脂蛋白E基因敲除鼠斑块内血管新生和斑块面积的影响。方法 8周龄雄性载脂蛋白E基因敲除鼠普通饲料喂养2 4周,然后随机分为