大鼠谷氨酰胺合成酶基因的克隆及其在Hela-G细胞中的表达

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目的克隆大鼠谷氨酰胺合成酶(GS)基因,构建其真核表达载体,并观察其在Hela-G细胞中的表达。方法采用RT-PCR方法,以大鼠大脑皮层总RNA为模板,扩增GS基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中。以LipofectamineTM2000试剂转染pEGFP-N3-GS表达载体至Hela-G细胞中进行瞬时真核表达。以免疫细胞化学方法鉴定GS的表达。结果从大鼠大脑皮层组织中克隆到序列正确的GS全长编码序列。所构建的pEGFP-N3-GS质粒在Hela-G细胞中获得高效表达。结论大鼠GS基因的克隆、真核表达载
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