【摘 要】
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目的探讨核因子-κB(NF-κB)介导肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对骨肉瘤增长的影响及其作用机制。方法选取4～6周无特定病原体级Balb/c雄性裸鼠15只，数字表法随机分为人骨肉瘤MG63细胞组、人单核巨噬细胞系THP-1细胞组、MG63＋THP-1混合细胞组3组，每组5只。于裸鼠右侧腋窝皮下注射浓度为1.0×108/mL的不同细胞悬液制备裸鼠成瘤模型：MG63细胞组裸鼠每只注射MG63细胞悬液0
【机 构】
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郑州大学附属肿瘤医院（河南省肿瘤医院） 骨与软组织肿瘤科，郑州 450008,郑州大学附属肿瘤医院（河南省肿瘤医院） 骨与软组织肿瘤科，郑州 450008,郑州大学公共卫生学院卫生毒理学系，郑州 45
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目的探讨核因子-κB(NF-κB)介导肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对骨肉瘤增长的影响及其作用机制。
方法选取4～6周无特定病原体级Balb/c雄性裸鼠15只，数字表法随机分为人骨肉瘤MG63细胞组、人单核巨噬细胞系THP-1细胞组、MG63＋THP-1混合细胞组3组，每组5只。于裸鼠右侧腋窝皮下注射浓度为1.0×108/mL的不同细胞悬液制备裸鼠成瘤模型：MG63细胞组裸鼠每只注射MG63细胞悬液0.2 mL，THP-1细胞组裸鼠每只注射THP-1细胞悬液0.2 mL，MG63＋THP-1混合细胞组裸鼠每只注射MG63＋THP-1混合细胞悬液(9∶1)0.2 mL。注射细胞后每天观察各组裸鼠是否出现移植瘤，从MG63组和MG63＋THP-1混合细胞组均出现移植瘤当天开始，用游标卡尺测量移植瘤的长径和短径，并计算移植瘤体积，此后每5天测量1次，对比不同时间各组移植瘤生长情况；注射细胞后第25天处死裸鼠，剥离移植瘤，对比各组移植瘤质量。将移植瘤置于10%甲醛中固定，制备石蜡切片，采用HE染色，观察各组移植瘤的肿瘤特征改变；采用免疫组织化学SP染色，观察各组移植瘤中核转录因子NF-κB蛋白的表达情况；采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件定量分析比较各组移植瘤中NF-κB蛋白的表达水平。
结果THP-1细胞组裸鼠没有形成移植瘤。MG63＋THP-1混合细胞组和MG63细胞组的裸鼠分别从注射细胞后第7天、第10天开始腋窝皮下可触及移植瘤，且随时间增加，肿瘤体积逐渐增大；第10、15、20和25天MG63＋THP-1混合细胞组裸鼠移植瘤体积分别为(474.4±56.1)、(945.0±79.7)、(2 886.0±462.3)、(3 319.6±388.4)mm3，均明显大于MG63细胞组的移植瘤体积(233.3±28.2)、(669.6±75.9)、(1 464.0±135.2)、(2 068.0±223.2)mm3，差异均有统计学意义(t＝3.536、2.504、2.952、2.794, P值均<0.05)。在种植细胞后第25天处死裸鼠，MG63＋THP-1混合细胞组移植瘤质量(0.920±0.134)g，明显大于MG63细胞组(0.544±0.079)g，差异有统计学意义(t＝2.404, P<0.05)。移植瘤HE染色显示，MG63细胞组和MG63＋THP-1混合细胞组移植瘤均可见明显的肿瘤特征改变。免疫组织化学SP染色显示，NF-κB蛋白在MG63细胞组和MG63＋THP-1混合细胞组移植瘤组织和组织间隙均呈高表达状态；检测NF-κB蛋白表达水平，MG63＋THP-1混合细胞组NF-κB蛋白吸光度值(0.362±0.006)，明显大于MG63细胞组NF-κB蛋白吸光度值(0.326±0.006)，差异有统计学意义(t＝9.895, P<0.05)。
结论TAMs可以促进骨肉瘤的增长，其作用机制可能与NF-κB蛋白高表达有关。
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