【摘 要】
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建立将叠氮溴化丙锭（PMA）与定量PCR（qPCR）技术结合,用于检测热灭活菌背景条件下的大肠杆菌活菌的方法。结果表明：5min以上的强烈光照可以使PMA与DNA共价交联,同时完全钝化游离的PM
【机 构】
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华南理工大学轻工与食品学院,东莞出入境检验检疫局
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目(9151064101000070);东莞市高等院校科研机构和医疗卫生单位科技计划项目(201074);广东省科技计划项目(2011B020314004);华南理工大学中央高校基本科研业务费项目(2011ZM0101);华南理工大学百步梯攀登计划研究项目
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建立将叠氮溴化丙锭（PMA）与定量PCR（qPCR）技术结合,用于检测热灭活菌背景条件下的大肠杆菌活菌的方法。结果表明：5min以上的强烈光照可以使PMA与DNA共价交联,同时完全钝化游离的PMA以避免＂假阴性＂结果;抑制死菌DNA扩增的最低PMA质量浓度为10μg/mL,不抑制活菌DNA扩增的最高PMA质量浓度为20μg/mL。当活菌/总菌大于1%时,经PMA预处理,可以消除热灭活菌DNA的干扰,实现对活菌的定量检测。
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