新型的病毒-基因治疗系统CNHK500-hγ的构建

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目的 研制出一种新的基因-病毒治疗系统.方法通过基因操作技术将主要晚期启动子(MLP)调控的人干扰素-γ基因插入腺病毒E1A基因受hTERT启动子调控、E1B基因受HRE启动子调控的增殖病毒载体质粒PXC70-HRE-TP的E1A上游,得到腺病毒质粒pSG500-hγ.通过pSG500-hγ与质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-hγ.用TCID50方法测定病毒滴度.通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力.利用ELISA法检测人干扰素-γ抗癌基因的表达.结果CNHK500-hγ的病毒滴度为4×109 pfu/ml,增殖实验结果证实CNHK500-hγ可以选择性地在端粒酶阳性的肝癌细胞中增殖,CNHK500-hγ所携带的人干扰素-γ基因在肝癌细胞株中的表达量(442μg/L)明显高于携带该基因的非增殖型腺病毒载体(120 μg/L)Ad-hγ(P<0.005).结论CNHK500-hγ是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。

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