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摘 要 目的：探讨VEGF在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达和临床意义。方法：应用免疫组化法检测45例卵巢上皮癌，11例卵巢良性上皮性肿瘤，7例正常卵巢组织中VEGF的表达，及其与临床病理参数间的相关性。结果：卵巢上皮癌中VEGF的阳性表达率比良性肿瘤（P=0.021）和正常卵巢组织中的表达率明显增高；在卵巢上皮癌组织中，VEGF的阳性表达率随着临床分期的增加而升高，但无统计学差异(P＝0.371)；VEGF的表达率与盆腔淋巴结转移正相关（P=0.007）。结论：VEGF在卵巢上皮癌中呈高表达，且与盆腔淋巴结转移密切相关，表明VEGF在卵巢上皮癌的发生、发展及转移过程中可能发挥重要作用。
关键词 卵巢肿瘤 VEGF
资料与方法
一般材料：选自西安交通大学第二医院及陕西省纺织医院2000~2005年手术切除的卵巢组织标本63例。病理组织学诊断卵巢恶性上皮性肿瘤45例，卵巢良性上皮性肿瘤11例，正常卵巢7例。患者年龄32~74岁，平均52.3岁。标本经10%甲醛固定后常规石蜡包埋，切片厚度4 μm。所有标本均常规HE染色复检。卵巢恶性肿瘤患者术前均未接受放射治疗或化学治疗。按WHO分类标准进行分类。组织学分型: G1级10例，G2级21例，G3级14例。根据国际妇产科协会(FIGO) 1985年统一制定的标准进行临床分期: Ⅰ期12例，Ⅱ期8例，Ⅲ期18例，Ⅳ期7例。
实验方法：所有标本经10%甲醛常规固定，石蜡包埋，4μm连续切片。分别进行HE染色和免疫组化染色。鼠抗人VEGF单克隆抗体，为美国产品。免疫组化SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京。本实验采用免疫组化SP法，组织切片常规二甲苯脱蜡,乙醇梯度水化,过氧化动物血清封闭组织内非特异抗原,室温孵育10分钟;加入一抗,4℃冰箱过夜;加入二抗，37℃恒温箱中孵育30分钟;加入链霉素抗生物素-过氧化物酶溶液,37℃恒温箱中孵育30分钟;DAB显色,苏木素复染,二甲苯透明,中性树胶封片。
质量控制：每个染色流程均设对照作为质量控制标准,阳性对照采用已知的阳性组织切片,阴性对照采用PBS代替一抗。
判定标准： VEGF蛋白阳性产物定位于细胞浆。将阳性细胞按其染色数量和显色程度分为四级。在高倍镜下随机选取10个视野，分别计数100个肿瘤细胞，将阳性细胞所占的百分数：≤5％、5%~35％、36%~65％、≥65％分别评为0、1、2、3分；根据细胞内出现黄色的深浅将无显色、浅黄色、桔黄色、棕黄色分别计为0、1、2、3分。两项相加除以2，作为该切片的最终评分，将0、1、1.5~2、2.5~3分别评为-、＋、＋＋、＋＋＋［１］。
统计学处理：所有数据用SPSS11.5统计软件分析，两样本率的比较用 X2 检验，各指标间相关性分析用Spearman相关分析，rs表示相关度，P<0.05有统计学意义。
结 果
卵巢上皮性肿瘤组织中VEGF的表达情况：VEGF特异地定位于肿瘤细胞的细胞浆中，表现为棕黄色阳性颗粒。卵巢上皮性肿瘤组织中VEGF的表达情况见表1，恶性组中VEGF的阳性表达率明显高于良性组（P＝0.021）和对照组。
P值被估计：良性组与恶性组之间VEGF与卵巢上皮癌临床病理参数间的关系：VEGF表达与卵巢上皮癌临床病理参数间的关系见表2。VEGF在45例卵巢上皮癌组织中的阳性表达率与盆腔淋巴结转移呈正相关（rs=0.396），且有显著性差异(P＝0.007)；VEGF表达随临床分期的增加而升高，但无统计学意义（P=0.371）；与患者年龄、病理类型及病理学分级间无相关性(P>0.05)。
讨 论
本研究表明，VEGF在卵巢癌组织中高水平表达，表达率为77.8％，与盆腔淋巴结的转移呈正相关,提示在肿瘤生长过程中，VEGF表达增加，导致血管形成加快，出现大量结构和功能异常的肿瘤血管，形成转移，这与Erik等的研究结果相一致，其研究发现交界性卵巢肿瘤出现镜下微浸润时，VEGF浓度是该组中位数的10倍，并且出现不良结局。在研究VEGF的表达与卵巢上皮癌临床分期的关系时，Shen等发现, 在卵巢肿瘤的各期中均有VEGF 表达, 但表达的程度有显著差异。Brustmann 等也有类似的报道, 同时, 其阳性表达率还与肿瘤细胞有丝分裂活性呈正相关。故可将VEGF 作为一个反映卵巢肿瘤恶性程度的生物学指标。本实验VEGF在中、低分化及Ⅲ、Ⅵ期的卵巢上皮癌组织中阳性表达率高于在高分化及Ⅰ、Ⅱ期的阳性表达率，但无统计学差异，这或许与各期病例较少有关。VEGF表达与病理类型间无统计学相关性。
总之，VEGF及其受体是卵巢肿瘤生长和转移中最重要的调节因子，但不是唯一的，所以其与其他相关因子之间的作用及其与VEGF系统之间的关系，还有待于进一步研究。
参考文献
1 乐杰，主编.妇产科学.第6版.北京：人民卫生出版社，2005,31~311
关键词 卵巢肿瘤 VEGF
资料与方法
一般材料：选自西安交通大学第二医院及陕西省纺织医院2000~2005年手术切除的卵巢组织标本63例。病理组织学诊断卵巢恶性上皮性肿瘤45例，卵巢良性上皮性肿瘤11例，正常卵巢7例。患者年龄32~74岁，平均52.3岁。标本经10%甲醛固定后常规石蜡包埋，切片厚度4 μm。所有标本均常规HE染色复检。卵巢恶性肿瘤患者术前均未接受放射治疗或化学治疗。按WHO分类标准进行分类。组织学分型: G1级10例，G2级21例，G3级14例。根据国际妇产科协会(FIGO) 1985年统一制定的标准进行临床分期: Ⅰ期12例，Ⅱ期8例，Ⅲ期18例，Ⅳ期7例。
实验方法：所有标本经10%甲醛常规固定，石蜡包埋，4μm连续切片。分别进行HE染色和免疫组化染色。鼠抗人VEGF单克隆抗体，为美国产品。免疫组化SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京。本实验采用免疫组化SP法，组织切片常规二甲苯脱蜡,乙醇梯度水化,过氧化动物血清封闭组织内非特异抗原,室温孵育10分钟;加入一抗,4℃冰箱过夜;加入二抗，37℃恒温箱中孵育30分钟;加入链霉素抗生物素-过氧化物酶溶液,37℃恒温箱中孵育30分钟;DAB显色,苏木素复染,二甲苯透明,中性树胶封片。
质量控制：每个染色流程均设对照作为质量控制标准,阳性对照采用已知的阳性组织切片,阴性对照采用PBS代替一抗。
判定标准： VEGF蛋白阳性产物定位于细胞浆。将阳性细胞按其染色数量和显色程度分为四级。在高倍镜下随机选取10个视野，分别计数100个肿瘤细胞，将阳性细胞所占的百分数：≤5％、5%~35％、36%~65％、≥65％分别评为0、1、2、3分；根据细胞内出现黄色的深浅将无显色、浅黄色、桔黄色、棕黄色分别计为0、1、2、3分。两项相加除以2，作为该切片的最终评分，将0、1、1.5~2、2.5~3分别评为-、＋、＋＋、＋＋＋［１］。
统计学处理：所有数据用SPSS11.5统计软件分析，两样本率的比较用 X2 检验，各指标间相关性分析用Spearman相关分析，rs表示相关度，P<0.05有统计学意义。
结 果
卵巢上皮性肿瘤组织中VEGF的表达情况：VEGF特异地定位于肿瘤细胞的细胞浆中，表现为棕黄色阳性颗粒。卵巢上皮性肿瘤组织中VEGF的表达情况见表1，恶性组中VEGF的阳性表达率明显高于良性组（P＝0.021）和对照组。
P值被估计：良性组与恶性组之间VEGF与卵巢上皮癌临床病理参数间的关系：VEGF表达与卵巢上皮癌临床病理参数间的关系见表2。VEGF在45例卵巢上皮癌组织中的阳性表达率与盆腔淋巴结转移呈正相关（rs=0.396），且有显著性差异(P＝0.007)；VEGF表达随临床分期的增加而升高，但无统计学意义（P=0.371）；与患者年龄、病理类型及病理学分级间无相关性(P>0.05)。
讨 论
本研究表明，VEGF在卵巢癌组织中高水平表达，表达率为77.8％，与盆腔淋巴结的转移呈正相关,提示在肿瘤生长过程中，VEGF表达增加，导致血管形成加快，出现大量结构和功能异常的肿瘤血管，形成转移，这与Erik等的研究结果相一致，其研究发现交界性卵巢肿瘤出现镜下微浸润时，VEGF浓度是该组中位数的10倍，并且出现不良结局。在研究VEGF的表达与卵巢上皮癌临床分期的关系时，Shen等发现, 在卵巢肿瘤的各期中均有VEGF 表达, 但表达的程度有显著差异。Brustmann 等也有类似的报道, 同时, 其阳性表达率还与肿瘤细胞有丝分裂活性呈正相关。故可将VEGF 作为一个反映卵巢肿瘤恶性程度的生物学指标。本实验VEGF在中、低分化及Ⅲ、Ⅵ期的卵巢上皮癌组织中阳性表达率高于在高分化及Ⅰ、Ⅱ期的阳性表达率，但无统计学差异，这或许与各期病例较少有关。VEGF表达与病理类型间无统计学相关性。
总之，VEGF及其受体是卵巢肿瘤生长和转移中最重要的调节因子，但不是唯一的，所以其与其他相关因子之间的作用及其与VEGF系统之间的关系，还有待于进一步研究。
参考文献
1 乐杰，主编.妇产科学.第6版.北京：人民卫生出版社，2005,31~311