【摘 要】
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以T-2毒素与琥珀酸为原料,通过琥珀酸酐法合成出T-2毒素半抗原T-2HS,再通过活泼酯法,将T-2毒素半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)共价偶联,合成出T-2毒素人工抗
【机 构】
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中国农业科学院油料作物研究所,农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,农业部油料产品质量安全风险评估实验室,农业部生物毒素检测重点实验室,农业部油料及制品质量监督检验测试中心
【基金项目】
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国家农产品质量安全风险评估重大项目(GJFP2014006);国家支撑计划课题(2012BAB19B09);农业行业科技专项(201203094)
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以T-2毒素与琥珀酸为原料,通过琥珀酸酐法合成出T-2毒素半抗原T-2HS,再通过活泼酯法,将T-2毒素半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)共价偶联,合成出T-2毒素人工抗原T-2HSBSA和T-2HS-OVA,以T-2HS-BSA作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合和阳性筛选,共获得4株T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别是1D6、2A8、2C5和4G3。其中2C5分泌的抗体灵敏度(IC50)最高,达0.13μg/kg,特异性强,与HT-2的交叉反应率仅为4%,与FB1、DON、ZEN无交叉反应。进一步利用该抗体建立了间接竞争ELISA检测方法,最低检测限为0.015μg/kg,检测范围(IC20~IC80)为0.05~57.6μg/kg,该方法对大豆、玉米、花生等粮油产品的检测范围为0.5~576μg/kg,在线性范围内加标回收率为93.5%~107.5%。本研究建立的检测方法可用于大豆、玉米、花生等多种粮油产品中T-2毒素的检测。
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