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目的
比较烧冲复合伤早期大鼠肺组织蛋白质组学表达差异。
方法采用清洁级SD大鼠18只,用随机数表法分为烧冲复合伤组和单纯冲击伤组各9只。于致伤后6 h,提取左侧肺组织蛋白。运用差异蛋白质组学方法,对两组肺组织蛋白提取物分别进行双向凝胶电泳(2-DE)。使用PD Quest图像分析,找出差异表达的蛋白,并进一步进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,结合生物信息检索,确定烧冲复合伤早期大鼠急性肺损伤发生时差异表达的蛋白。同时观察大鼠伤后6 h肺组织病理改变。
结果去除实验中的死亡损耗后,最终每组均衡纳入8只大鼠进行统计学分析。2-DE凝胶结果显示,单纯冲击伤组肺组织得到736±47个蛋白点,烧冲复合伤组肺组织凝胶上共得到782±30个蛋白点,配比率为91%。PD Quest图像分析结果,有显著差异改变的蛋白点14个,其中烧冲复合伤组有10个点丰度显著增高(变化2倍以上),4个点丰度显著降低(变化2倍以上)。进一步行MALDI-TOF-MS分析,将得到的肽质量指纹峰谱(PMF)经过蛋白质数据库检索比对,得到12个有意义的蛋白质:参与应激反应的热休克蛋白27/70、参与代谢与免疫反应的碳酸甘酶2、细胞色素c氧化酶、ATP合成酶、Ca2+转运酶、参与细胞骨架的肌动蛋白结合蛋白2蛋白等。
结论烧冲复合伤早期肺组织即出现了显著的蛋白质组学差异表达,其机制可能涉及与氧化应激、能量代谢变化、免疫应答反应、细胞骨架变化等相关蛋白。