目的 建立HepG2脂肪变模型,探讨混合脂肪酸对肝细胞氧化应激的作用,以及维生素E对脂肪变肝细胞氧化还原系统的影响.方法 采用不同浓度梯度(0.125、0.250、0.500、1.000 mmol/L)的混合脂肪酸(油酸∶软脂酸=2∶1)孵育HepG2细胞,细胞计数试剂盒细胞增殖法测细胞活力.分别采用0.5和1.0mmol/L的混合脂肪酸孵育HepG2细胞,在12、24、48 h进行油红0染色和细胞内TG含量的测定.建立HepG2脂肪变模型后检测细胞内过氧化产物丙二醛含量和超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽水平,并予以维生素E干预,检测维生素E对丙二醛、SOD和还原型谷胱甘肽的影响.两组计量资料比较采用t检验.结果 随着作用时间的延长和混合脂肪酸浓度的增加,光学显微镜下可见HepG2细胞内脂滴数量逐渐增加,TG含量也逐渐增加.干预后24 h,混合脂肪酸0.5 mmol/L组和1.0 mmol/L组的HepG2细胞内丙二醛含量较对照组分别增加了56.3%(t=4.28,P=0.012 9)和66.6%(t=6.87,P=0.002 4),还原型谷胱甘肽水平较对照组分别降低了30.6% (t=4.24,P=0.013 3)和43.7% (t=6.13,P=0.003 6),差异均有统计学意义.混合脂肪酸1.0 mmol/L组细胞内SOD水平在24 h较对照组降低了39.2%(t=3.20,P=0.032 8),0.5 mmol/L组在48 h较对照组降低了40.6%(t=8.27,P=0.001 2),差异均有统计学意义.维生素E干预24、48 h时,可使脂肪变性HepG2细胞内丙二醛含量比同时间实验组下降31.8%(t=4.00,P=0.016 1)和37.5%(t=8.27,P=0.004 2),差异有统计学意义;干预12、24、48 h时,SOD水平分别升高1.9%、14.5%和50.5%;还原型谷胱甘肽水平分别升高4.1%、33.2%和52.0%.结论 油酸和软脂酸比例为2∶1、浓度为0.5 mmol/L的混合脂肪酸可成功诱导HepG2细胞脂肪变模型.HepG2细胞脂肪变性时发生明显的氧化应激,抗氧化剂维生素E能在一定程度上减轻氧化应激。
HepG2脂肪变模型中氧化应激的发生及维生素E对其的干预作用
【摘 要】
:
目的 建立HepG2脂肪变模型,探讨混合脂肪酸对肝细胞氧化应激的作用,以及维生素E对脂肪变肝细胞氧化还原系统的影响.方法 采用不同浓度梯度(0.125、0.250、0.500、1.000 mmol/L)的混合脂肪酸(油酸∶软脂酸=2∶1)孵育HepG2细胞,细胞计数试剂盒细胞增殖法测细胞活力.分别采用0.5和1.0mmol/L的混合脂肪酸孵育HepG2细胞,在12、24、48 h进行油红0染色和细
【机 构】
:
河南大学附属淮河医院感染科,上海长海医院消化科,200025上海交通大学医学院附属仁济医院健康保健中心,200025上海交通大学医学院附属仁济医院健康保健中心,200025上海交通大学医学院附属仁济医
【出 处】
:
中华消化杂志
【发表日期】
:
2014年34期
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