清咽泻火颗粒的提取工艺探究

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  摘要:清咽泻火颗粒是一种中成药,为清热剂,主要治疗急慢性咽炎、扁桃体炎等,本文主要通过正交设计方法来实现对清咽泻火颗粒的提取工艺的深入研究,具体的方式是通过对溶媒量、提取时间、提取次数等因素和参数的考量,来结合评价指标——蓼大青叶水提干浸膏的甲醇提取液和黄芩苷含量。从而确定了清咽泻火颗粒的提取工艺。以期为相关的人士提供参考。
  关键词:清咽泻火;提取工艺;实验研究
  引言:
  我国的中药制剂的成分较为复杂,其制剂的质量好坏与很多因素有关,清咽泻火颗粒就是一种中成清热解毒制剂,它的组成成分复杂,其中就包括蓼大青叶、黄芩、射干、牛蒡子、青果、甘草等,在药理上它具有清热利咽、泻火解毒的作用,对于各种由于体热湿毒、热毒内盛、外感风寒引起的咽喉肿痛、火热难抑、口舌生疮都有很好的治療效果。而要想制剂能够发挥最好的作用,就要对其进行最有效的提取,提取的关键点就是对评价指标的选择,因此我们采用正交设计法,对其提取工艺进行了研究,优选出最佳工艺。
  一、仪器与试药
  751型紫外可见分光光度计;CS-9000双波长薄层扫描仪(日本岛津公司);定量毛细管;聚酰胺-6薄膜;黄芩苷;蓼大青叶、黄芩等药材,经中医药大学中药学院鉴定教研室鉴定。所用试剂、药品均为分析纯。
  二、实验部分
  1.提取工艺路线确定
  蓼大青叶为方中君药,其主要成分包括色胺酮类,靛蓝、靛玉红类和喹唑酮类,临床多以水煎剂应用。其中可溶于水的喹唑酮为其抗病毒的有效成分。考虑到本品为叶类药材,质地松软易碎,不宜高温久煎,故单独用水微沸提取。黄芩等其余诸药,或因其有效成分可溶于水,或因其水提物具有抑菌、抗病毒、解热、镇咳等作用,或因其有效成分不明确、临床多以水煎剂应用等原因,亦采用水煎煮提取。
  2.蓼大青叶提取工艺研究
  (1)评价指标的选择:蓼大青叶为君药,中国药典规定用靛蓝作为蓼大青叶药材的鉴定标准,但靛蓝、靛玉红的脂溶性较强,在现行的制剂生产工艺中很难将其提出,故选择蓼大青叶水提干浸膏的甲醇提取液的做为第一评价指标。此外,水煎液的总固体收率与剂型选择、服用量、工艺难易都有直接关系,故选取出膏率为第二评价指标。按文献方法进行多指标实验综合评分。
  (2)考察因素及其水平:影响蓼大青叶水提取效果的主要因素有溶媒量、提取时间和提取次数,为此,我们编制了因素水平表1。
  正交试验与结果:称取3倍处方量药材,按正交表设计方案进行实验,并进行方差分析。结果显示因素A有非常显著影响,B\C有显著影响,各因素影响大小的顺序为A>B>C。考虑到蓼大青叶为质地松薄的叶类药材,久煎易烂,不好过滤,故从生产实际出发,确定最佳提取工艺为,即提取2次,第1次加水14倍,提取2h。第2次加水12倍。提取1h。按调整前后的工艺分别对蓼大青叶进行提取,测定出膏率和E(310nra)。两组之间无显著性差异。
  3.黄芩等其余诸药提取工艺研究
  (1)评价指标的选择:
  黄芩为方中臣药,黄芩苷为其主要有效成分,具有广谱抗菌、抗病毒作用,故确定黄芩苷含量为第一评价指标;基于与蓼大青叶相同的考虑,选择水煎液的总固体收率为第二评价指标。按文献方法进行多指标实验综合评分。
  (2)考察因素及其水平:见表2。
  (3)黄芩苷含量测定:双波长薄层扫描法。吸附剂:聚酰胺—6薄膜;展开剂:36%乙酸;展开方式:上行法;展距:8cm;测定波长292nm,参比波长370nm;正交试验与结果:称取4倍处方量药材(其中黄芩以饮片形式加入,在煮提前与其余四味药混匀),按正交表设计方案进行实验,并进行方差分析。
  黄芩等其余诸药提取工艺正交试验方差分析结果表明,因素A、C、D有非常显著影响,各因素影响大小的顺序为C>D>A>B,其中B影响不显著,因此结合生产实际,为了节省时间、能源和人力,降低生产成本,提取时间选择稍短的B2。故最终确定最佳提取工艺,即将青果粉碎成粗粉,与另外四药混合,用水煮2次,第1次加水10倍,提取2h,第2次加水8倍,提取1h。按调整前后的工艺分别对黄芩等其余诸药进行提取,测定出膏率和黄芩苷含量,两组之间无显著性差异。通过比较黄芩原料与提取物中黄芩苷的含量,计算黄芩苷的提取率为80.83%。
  三、实验结论
  中药复发制剂一般都会含有很多种类、很多药理特性的成分,在提取上如果不选择较为合理的评价指标,一来对于结果的价值和参考性就会大大折扣,二来,也会严重影响优秀提取工艺的选择,评价指标关系着制剂的合理性、安全性、有效性。因此要在确定了合适的评价指标之后,再通过试验来确定其合理的工艺路线和工艺条件。因此,针对不同的中药、不同的复方及其不同的治疗作用,评价指标选择的合理与否,对中药复方制剂的质量优劣至关重要。
  蓼大青叶中所含靛蓝、靛玉红因系脂溶性成分,在其水提物中含量甚少,加热浓缩过程中的损失更高达92.4%。并且以上这两种成分虽然是药制剂中的组成成分,但是对于抗病毒的性质上,并不具备抗病毒的活性,如果以这两种成分的含量高低来作为评价指标实现对提取工艺的优选,那么会直接影响最终的结果,导致结果的科学性、合理性受到怀疑,并且对优选的提取工艺也得再进行商榷。而蓼大青叶中所含喹唑酮类成分,这种物质的化学性特征很符合临床用药习惯及较为广泛应用的制剂生产工艺。因此如果将这种成分作为优选提取工艺的评价指标,那么在实验的方法上就很具有针对性和参考价值。
  但目前尚不能得到大量4(3H)+喹唑酮对照品,无法进行准确的定量测定,考虑到4(3H)+喹唑酮类成分的含量与蓼大青叶水提干浸膏的甲醇提取液的元素呈正相关,我们在此次的工艺筛选中选择在其UV最大吸收波长(310nm)处,测定蓼大青叶水提干浸膏的甲醇提取液做为评价指标。试验结果表明,该方法切实可行,有一定的推广应用价值。
  结语:
  笔者通过对资料的研究和分析,通过正交法设计实现了对请咽泻火颗粒提取工艺的探究,结果显示,中药复方制剂提取工艺的应用,必须应该首先对评价的指标进行合理的选择。结合具体的中药成分,来实现对不同中药、不同处方的安全性提取。重要复方制剂成分极为复杂,只有合理有效的提取工艺才能保证中药制剂的安全性和有效性,因此科学、合理的评价指标是保证中药复方制剂质量的关键。
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